重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人E-钙粘蛋白(Recombinant Human E-Cadherin, Epithelial Cadherin)是一种通过基因工程技术在体外表达和纯化的关键细胞粘附分子。作为上皮组织结构完整性的“分子胶水”和肿瘤转移的“抑癌开关”,E-Cadherin在维持细胞极性、调控胚胎发育及抑制肿瘤侵袭中扮演着核心角色。该重组蛋白不仅是研究细胞粘附与信号转导机制的基石工具,也是癌症诊疗与药物开发中的重要靶点。
产品名称; Recombinant Human E Cadherin
别名; Arc 1, CADH1_HUMAN, Cadherin 1, cadherin 1 type 1 E-cadherin, Cadherin-1, Cadherin1, CAM 120/80, CD 324, CD324, CD324 antigen, cdh1, CDHE, E-Cad/CTF3, E-cadherin, ECAD, Epithelial cadherin, epithelial calcium dependant adhesion protein, LCAM, Liver cell adhesion molecule, UVO, Uvomorulin
宿主; E.Coli
表达区间; 155-707
分子量; 60.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk2 | 细胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化DNA甲基转移酶1 | 组织果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALD)定量酶联免疫试剂盒 |
APC蛋白标记试剂盒 | 细胞BAD蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
血液乙酰转移酶(LCAT)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 细胞游离毛地黄皂苷法(DIGITONIN)舒尔茨染色试剂盒 |
饮料激酶法定量pcr检测试剂盒 | 白细胞介素17受体E样蛋白抗体 |
睾丸凋亡基因 | KIAA1712蛋白抗体 |
细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达比色法定量pcr检测试剂盒 | 组织肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
组织牛病毒性腹泻病毒II型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -2;BVDV-2)定性基因pcr检测试剂盒 | 细胞/组织高质纯化溶酶体分离试剂盒 |
转录因子同源蛋白Nkx6.2 | FBXO34蛋白抗体 |
甲基化组蛋白H3(tri methyl K4)单克隆 | 磷酸化粘着斑激酶抗体 |
RAD51D蛋白 | 蛋白C抑制因子抗体 |
血液糖类总量铁氰化物比色法定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Human E Cadherin原癌基因CBL2抗体 |
AF680标记的神经元素3抗体 | A-Raf抗体 |
关键字: E Cadherin;60.7 kDa ;155-707;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。