重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人FAHD1蛋白(Recombinant Human Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Protein 1)是一种通过基因工程技术在体外表达和纯化的具有特定酶活性的代谢酶。作为烯醇酶超家族的一员,FAHD1以其独特的脱羧酶和水解酶活性,在细胞代谢调控和疾病机制研究中逐渐崭露头角。该重组蛋白是研究代谢酶动力学、自身免疫性疾病及癌症生物学的重要工具。
产品名称; Recombinant Human FAHD1
别名; Acylpyruvase FAHD1, C16orf36, Chromosome 16 open reading frame 36, DKFZP566J2046, FAHD1, FAHD1_HUMAN, Fumarylacetoacetate hydrolase domain containing protein 1, Fumarylacetoacetate hydrolase domain-containing protein 1, MGC74876, mitochondrial, YISK like, YISK like/RJD15, YisK-like protein, YISKL
宿主; E.Coli
表达区间; 1-224
分子量; 24.5 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9 | 间接酶联免疫试剂盒(含AP二抗) |
EHBP1蛋白 | 细胞CASPASE-2蛋白表达比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞色素P450亚酶CYP2C(AMD)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 细胞NF KAPPA B P50蛋白表达比色法定量酶联免疫试剂盒 |
裂解液VIII:细菌活性化蛋白制备溶液 | 革兰氏阴性细菌基因组DNA纯化试剂盒 |
组织基质金属抑制剂1(TIMP-1)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 磷酸化有丝分裂激酶A抗体 |
甘氨酸受体α1+甘氨酸受体α2 | 蛋白激酶锚定蛋白13抗体 |
全组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位染色试剂盒 | 石蜡切片胶原纤维(SIRIUS RED)染色试剂盒 |
植物组织细胞核高纯分离试剂盒 | 细胞硝酸盐含量比色法定量pcr检测试剂盒 |
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 | 嗅觉受体52D1抗体 |
环指蛋白126 | 28S核糖体蛋白S33抗体 |
PE-Cy7标记小鼠CD31单克隆 | 磷酸化白细胞介素-10受体a抗体 |
心肌肌球蛋白重链重组兔单克隆 | Recombinant Human FAHD1Wnt信号受体FZD2蛋白抗体 |
组织辅脂酶(COLIPASE)活性比色法定量检测试剂盒 | GTP酶IMAP家族成员2抗体 |
关键字: FAHD1;24.5 kDa; 1-224;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。