重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人FKBP14蛋白(Recombinant Human FK506-Binding Protein 14)是一种通过基因工程技术在体外表达和纯化的分子伴侣蛋白。作为FKBP(FK506-Binding Protein)家族的一员,FKBP14是一种位于内质网中的肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase),在蛋白质折叠和修饰过程中扮演着关键角色。该重组蛋白不仅是研究蛋白质折叠机制的重要工具,也是探索埃勒斯-丹洛斯综合征(EDS)等遗传性结缔组织疾病发病机理的关键靶点。
产品名称; Recombinant Human FKBP14
别名; 22 kDa FK506 binding protein, 22 kDa FK506-binding protein, 22 kDa FKBP, FK506 binding protein 14, FK506 binding protein 14 (22 kDa), FK506-binding protein 14, FKB14_HUMAN, FKBP 22, FKBP-14, FKBP-22, FKBP14, FKBP22, FLJ20731, Peptidyl prolyl cis trans isomerase, Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP14, PPIase, PPIase FKBP14, Rotamase
宿主; E.Coli
表达区间; 20-211
分子量; 21 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10 | (含HRP一抗) |
EGR1结合蛋白1 | 细胞RHO 蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
血液维生素B1高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | CASPASE-1蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
大量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒 | 真菌/酵母细胞壁完全可溶性总蛋白制备试剂盒 |
细胞LYNA激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 磷脂酰乙醇胺结合蛋白1抗体 |
钙粘附蛋白9 | 蛋氨酸亚砜还原酶B2抗体 |
血液蛋白氧化(羰基化;carbonyl)比色法测定试剂盒 | 冰冻切片胶原纤维(GIESON)染色试剂盒 |
植物细胞可溶性总核蛋白粗提制备试剂盒 | 细胞MAPKAP KINASE3激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
肿瘤细胞调亡素/死亡受体5 | 叶酸受体4抗体 |
环指蛋白107 | 22号染色体开放阅读框28抗体 |
PE-Cy7标记小鼠CD23单克隆 | 酪氨酸蛋白激酶受体B4抗体 |
细胞色素cP450 CYP26A1重组兔单克隆 | Recombinant Human FKBP14WDR68蛋白抗体 |
细菌抗生素(青)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 | G氨基丁酸B型受体结合蛋白抗体 |
关键字: FKBP14;21 kDa; 20-211;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。