重组蛋白(Recombinant Protein):

是指利用重组DNA或RNA技术,在体外人工制造的蛋白质。
这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段,插入到重组表达载体中,然后导入宿主细胞(如细菌、酵母、哺乳动物细胞等),
利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。
产品概述:

Gankyrin 最初因其在肝癌中的高表达而被发现,现已被确认为一种多功能的癌基因蛋白(Oncoprotein)。它不仅是26S蛋白酶体的 regulatory particle(19S 粒子)的组分,还在细胞周期调控、肿瘤发生发展及信号转导中发挥核心作用。重组人 Gankyrin 是研究癌症机制、蛋白酶体功能及药物筛选的重要工具。
产品名 | Recombinant Human Gankyrin | 分子量 | 26.3 kDa |
表达区间 | 1-226 | 货号 | XG-DB2043 |
别名
26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 10, 26S proteasome regulatory subunit p28, Ankyrin repeat protein, dJ889N15.2, Gankyrin, Hepatocellular carcinoma-associated protein p28 II, p28, p28(GANK), Proteasome (prosome, macropain) 26S subunit, non ATPase, 10, Proteasome 26S S10, PSD10_HUMAN, Psmd10
宿主; E.Coli
表达区间; 1-226
分子量; 26.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

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E3泛素连接酶NEDD4结合蛋白1 | 石蜡切片组织TNF BETA蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
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钙介质素 | 胆固醇25羟化酶抗体 |
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激活受体Atr | ADCK2蛋白抗体 |
PE-Cy5标记小鼠CD38单克隆 | 扩张型心肌病蛋白1G抗体 |
透明质酸合成酶2单克隆 | Recombinant Human GankyrinZCWPW2蛋白抗体 |
通用型HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒定量PCR扩增检测试剂盒 | G蛋白调节诱导神经突增生蛋白1抗体 |
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
关键字: Gankyrin;26.3 kDa; 1-226;
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