兔小肠隐窝上皮细胞

兔小肠隐窝上皮细胞

产品信息：

产品名称 兔小肠隐窝上皮细胞

组织来源 小肠组织
种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的兔小肠隐窝上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔小肠隐窝上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：兔小肠隐窝上皮细胞

组织来源：小肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔小肠隐窝上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

兔小肠隐窝上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现，在十二指肠末段和空肠头段极发达，向下逐渐减少和变矮，至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛，是由上皮和固有层向肠腔突起而成，形状不一，以十二指肠和空肠头段最发达。绒毛于十二指肠呈叶状，于空肠呈指状，于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍，绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺，又称肠隐窝，故小肠腺与绒毛的上皮是连续的，小肠腺直接开口于肠腔。
原代细胞接种：

细胞计数与密度调整

使用血球计数板或细胞计数仪准确计数，调整细胞密度至合适范围（不同细胞类型差异较大，一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml）

密度过低：细胞无法分泌足够的生长因子，难以存活；密度过高：细胞竞争营养物质，易出现接触抑制

培养基选择

优先使用原代细胞专用培养基，若使用通用培养基，需添加合适的生长因子、血清等补充成分（如成纤维细胞添加FGF，内皮细胞添加VEGF）

血清浓度：原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%，部分特殊细胞（如神经细胞）需使用无血清培养基

培养环境控制

温度：哺乳动物细胞一般为37℃，鸟类细胞38.5℃，昆虫细胞27℃

CO₂浓度：大多数细胞需要5%CO₂，维持培养基pH在7.2-7.4之间

湿度：培养箱湿度保持在70%-80%，避免培养基蒸发过快
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通用注意事项：

无菌操作：所有操作全程在超净台内进行，定期对超净台、培养箱进行消毒，使用无菌的培养基、血清、试剂

细胞状态监测：每天观察细胞形态、密度、颜色变化，记录生长情况，若发现细胞出现污染、形态异常、生长缓慢等问题，及时处理

培养基更换：原代细胞培养初期每2-3天更换一次培养基，传代后每1-2天更换一次，根据培养基颜色变化（变黄表示营养耗尽）灵活调整

避免过度操作：原代细胞较为脆弱，避免频繁吹打、离心，尽量减少对细胞的机械损伤

冻存备份：原代细胞分离成功后，及时冻存部分细胞作为备份，冻存液使用90%血清+10%DMSO，采用梯度降温法冻存