小鼠骨骼肌细胞
产品信息:
产品名称 小鼠骨骼肌细胞
组织来源 骨骼肌组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Skeletal Muscle Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X1896 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠骨骼肌细胞经α-Sarcomeric actin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠骨骼肌细胞
组织来源:骨骼肌组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件PLL(0.1mg/ml)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠骨骼肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞,细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方,细胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态:大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
原代细胞培养:
培养基选择:根据细胞类型选择专用培养基,如上皮细胞用上皮细胞培养基、成纤维细胞用成纤维细胞培养基,必要时添加血清(胎牛血清FBS常用,浓度10%-20%)、生长因子、抗生素等补充成分;培养基使用前需预热至37℃。
接种密度控制:原代细胞接种密度不宜过低,否则细胞难以分泌足够的自分泌因子支持生长,一般接种密度为1×10⁵-5×10⁵细胞/cm²;接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布。
培养环境监控:保持培养箱内37℃、5%CO₂的恒定环境,定期检查培养基颜色变化(变黄说明pH下降,需及时换液);原代细胞贴壁前避免频繁晃动培养瓶,贴壁后通常每2-3天换液一次。
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原代细胞分离:
组织样本处理:取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中,避免样本干燥和温度变化;修剪时去除坏死、结缔组织等杂质,尽量减小组织块体积以提高消化效率。
消化方法选择:
酶消化法:根据组织类型选对应酶(如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织),严格控制消化温度(通常37℃)和时间,每隔5-10分钟镜下观察,避免过度消化损伤细胞。
机械分离法:适合柔软组织(如脑、肝脏),通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞,操作时动作轻柔,减少细胞机械损伤。
细胞过滤与离心:用合适孔径的细胞筛(如100-200目)过滤细胞悬液,去除未消化的组织块;离心转速通常为1000-1500rpm,时间5-10分钟,避免高速离心导致细胞破裂。
关键字: 小鼠骨骼肌细胞;成纤维细胞样; 贴壁;
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