小鼠脊髓神经元细胞
产品信息：
产品名称 小鼠脊髓神经元细胞
组织来源 脊髓组织
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Spinal Cord Neuron Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 神经元细胞样 | 货号 | P-X1949 |
培养信息：
方法简介：实验室分离的小鼠脊髓神经元细胞采用胶原酶 - 胰酶联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的小鼠脊髓神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称：小鼠脊髓神经元细胞
组织来源：脊髓组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息：包被条件PLL(0.1mg/ml)
培养基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：神经元细胞样
传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液：0.125%胰蛋白酶小鼠脊髓神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：
小鼠脊髓神经元细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞，神经元含量少，分离纯化难度大，且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形，体积小，透亮，无突起。培养2-3d，可见胞体增大，突起增多延长；培养6-7d，细胞体大饱满，突起明显增加延长并交织成网，光晕明显，立体感强。培养20d后，死亡细胞明显增加，细胞出现内空泡，突起粗细不均，甚至脱壁，发生细胞崩解。
原代细胞分离：
组织取材
无菌操作是底线：取材前对动物/组织进行严格消毒，全程在超净台内操作，所有工具提前灭菌
新鲜度决定活性：取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中，30分钟内完成分离，若无法即时处理，可暂存于4℃冰箱（不超过24小时）
精准取材：避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织，比如分离肝细胞时要剔除胆囊，分离神经细胞时要去除脑膜
组织处理
机械法：通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织，适用于结缔组织较少的组织（如肝脏、肾脏），注意力度适中，避免过度研磨损伤细胞
酶解法：根据组织类型选择合适的酶：
胰蛋白酶：适用于消化上皮组织、肝、肾等，浓度0.25%-0.5%，消化时间15-30分钟，37℃
胶原酶：适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等，浓度0.1%-0.3%，消化时间1-4小时，37℃，可加入EDTA增强效果
透明质酸酶：常与胶原酶联用，消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织
联合法：机械剪碎后再进行酶解，兼顾效率与细胞活性
细胞筛选与纯化
过滤：使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织块
离心：800-1200RPM离心5-8分钟，弃上清后用PBS重洗2-3次，去除细胞碎片和酶液
特异性纯化：使用差速贴壁法（利用不同细胞贴壁速度差异）、密度梯度离心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分选或流式细胞术，获得高纯度目标细胞
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原代细胞实验注意事项：
取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好，冰上操作，减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0～P3，代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀，太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键，宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止，过度消化必死一批。
吹打轻柔，避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次，换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门，不反复观察、不反复拿进拿出，温度、pH 波动对原代杀伤极大。
关键字： 小鼠脊髓神经元细胞;神经元细胞样; 贴壁;
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