小鼠淋巴管内皮细胞
产品信息:
产品名称 小鼠淋巴管内皮细胞
组织来源 淋巴管
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Lymphatic Endothelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 货号 | P-X1936 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠淋巴管内皮细胞采用中性蛋白酶消化法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠淋巴管内皮细胞经VEGFR3免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠淋巴管内皮细胞
组织来源:淋巴管
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠淋巴管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠淋巴管内皮细胞分离自淋巴管组织;淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似,但管径较细,管壁较薄,瓣膜较多且发达,外形呈串珠状。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。它们管位于皮下,常与浅静脉伴行,收集皮肤和皮下组织的淋巴。深淋巴管与深部血管伴行,收集肌肉和内脏的淋巴。浅、深淋巴管之间有广泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常经过一个或多个淋巴结,从而把淋巴细胞带入淋巴液。主要功能是滤过淋巴液,产生淋巴细胞和浆细胞,参与机体的免疫反应。当局部感染时,细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们,则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴管内皮细胞(LEC)是衬覆于淋巴管内表面的一种单层扁平上皮,是构成淋巴管壁的主要结构,参与维持体液平衡,调节淋巴细胞再循环和机体的免疫反应和组织液及蛋白质的运输,在疾病过程中也起着重要作用。近年研究表明,LEC还在伤口愈合、淋巴管水肿和炎症扩散等病理过程中起重要作用,而且与肿瘤转移密切相关。淋巴管内皮细胞主要功能:①调节体液、蛋白和组织压力平衡;②为免疫系统的重要组成部分。淋巴管内皮细胞与主要病生理变化:①囊肿型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴结核。
原代细胞传代:
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
公司正在出售的产品:
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细胞分离与接种:
酶消化的“度”:酶液浓度和消化时间需精准控制,如胰蛋白酶浓度通常为0.25%,消化时间5-15分钟(根据组织类型调整),消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器,镜下观察到细胞变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化。
吹打力度适中:用巴氏吸管吹打细胞悬液时,避免用力过猛产生大量气泡,以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜,一般吹打10-15次即可,过度吹打会导致细胞膜破裂。
接种密度适配:根据细胞增殖速度调整接种密度,增殖快的细胞(如成纤维细胞)可适当降低密度,增殖慢的细胞(如神经元)需提高接种密度,确保细胞能相互支持生长。
关键字: 小鼠淋巴管内皮细胞;内皮细胞样;贴壁;
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