重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该酶在大肠杆菌(Escherichia coli)等系统中表达,具有生物活性,主要用于研究其催化单磷酸鸟苷(GMP)转化为二磷酸鸟苷(GDP)的分子机制,以及其在抗病毒前药激活、癌症代谢重编程(如ALK+非小细胞肺癌的耐药性)和遗传性视网膜疾病中的关键作用。
产品名 | Recombinant Human Guanylate kinase | 分子量 | 21.6 kDa |
表达区间 | 1-197 | 货号 | XG-DB2178 |
别名
ATP:GMP phosphotransferase, FLJ42686, FLJ43710, GMK, GMP kinase, Guanylate kinase, GUK1, KGUA_HUMAN
宿主; E.Coli
表达区间; 1-197
分子量; 21.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
透明质酸及粘蛋白1 | 细菌脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化CREB-1 | 破骨细胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
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高迁移率族蛋白N3 | KIAA1671蛋白抗体 |
冰冻切片组织HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 组织MAPKAP KINASE5激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
药物(folic acid)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 动物细胞染色体分离试剂盒 |
转录因子蛋白SIM2 | FITC标记小鼠CD28单克隆抗体 |
甲基化样蛋白2A | 内核膜蛋白MAN1抗体 |
PRRC1蛋白 | 蛋白激酶锚定蛋白13抗体 |
沙门氏菌(Salmonella)鉴定 | Recombinant Human Guanylate kinase液泡蛋白分选蛋白13D抗体 |
AF750标记的白介素1β抗体 | Bcl-2同源结构域样蛋白1抗体 |
关键字: Guanylate kinase;21.6 kDa; 1-197;
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