重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human HIF-1α(重组人缺氧诱导因子-1α)是一种在科研中广泛应用的重组蛋白,通常通过基因工程技术在大肠杆菌(E. coli)等表达系统中生产。HIF-1α是细胞感知和适应低氧环境的核心转录因子,作为HIF-1异源二聚体的氧调节亚基,它在氧气充足时极不稳定,会被迅速降解;而在缺氧条件下则会稳定并进入细胞核,与HIF-1β结合,激活一系列涉及血管生成、糖代谢和红细胞生成的基因表达。由于其在肿瘤代谢、免疫调节及缺血性疾病中的关键作用,重组人HIF-1α蛋白主要用于相关信号通路机
产品名 | Recombinant Human HIF-1A | 分子量 | 26.5 KDa |
表达区间 | 574-799 | 货号 | XG-DB2218 |
别名
ARNT interacting protein, bHLHe78, HIF 1 alpha, HIF 1alpha, HIF1, HIF1 ALPHA, HIF1A, HIF-1α, Member of PAS protein 1, MOP1, PASD8
宿主; E.Coli
表达区间; 574-799
分子量; 26.5 KDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
通用转录因子2H亚基2C | 糖类总量氨基苯硫酚荧光定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1 | 石蜡切片组织蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒-LEPTIN |
聚丙烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒 | 活化蛋白C(APC)活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
细胞异戊二烯焦磷酸异构酶(isopentenyl pyrophosphate isomerase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞羧酸酯酶(carboxylesterase;CE)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
营养补充剂L-天酶偶联反应比色法定量pcr检测试剂盒 | 阿米洛利结合蛋白1抗体 |
富含脯氨酸突触相关蛋白SHANK3 | KIAA0802蛋白抗体 |
IGF 蛋白表达ELISA定量pcr检测试剂盒 | 细胞Akt1/PKBa激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
药品阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 动物单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒 |
转导素β1X连锁蛋白 | FAM76B蛋白抗体 |
鸡新城疫血凝素-神经氨酸酶 | 钠通道蛋白8α抗体 |
PYGO1蛋白 | 二氢乳清酸脱氢酶抗体 |
组织HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR | Recombinant Human HIF-1A乙酰化组蛋白H2A抗体 |
AF750标记的山羊抗人乙肝表面抗原抗体 | APC-Cy5.5标记小鼠CD19单克隆抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: HIF-1A;26.5 KDa ; 574-799;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。