重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human HLA-E(重组人白细胞抗原E)是一种非经典的MHC I类分子重组蛋白,通常在大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞等表达系统中生产,并常带有His等标签以便于纯化和检测。HLA-E在结构上与经典MHC I类分子相似,但其多态性较低,主要功能是作为自然杀伤(NK)细胞和部分T细胞表面CD94/NKG2受体的配体,在免疫监视、免疫耐受及肿瘤免疫逃逸中发挥关键的调节作用。它通常结合来自其他经典HLA分子信号肽的特定肽段,通过与抑制性受体NKG2A结合来抑制免疫细胞的活性,从而帮助肿瘤
产品名 | Recombinant Human HLA E | 分子量 | 53.2 kDa |
表达区间 | 22-305 | 货号 | XG-DB2231 |
别名
HLA class I histocompatibility antigen E alpha chain, EA1.2, EA2.1, HLA 6.2, HLA class I histocompatibility antigen alpha chain E, HLA class I histocompatibility antigen E alpha chain precursor, HLA6.2, HLAE, Lymphocyte antigen, Major histocompatibility complex class I E, MHC, MHC class I antigen E, MHC HLA E alpha 1, MHC HLA E alpha 2.1, QA1
宿主; E.Coli
表达区间; 22-305
分子量; 53.2 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
维甲酸相关孤儿受体γ | 果蝇细胞培养基 |
颗粒溶素 | 基因甲基化检测DNA修饰试剂盒 |
化妆品环(cyclamate)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 冰冻切片组织IGF 蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
体液半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
转基因棉花MON88913品系基因pcr检测试剂盒 | X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体 |
富含亮氨酸跨膜纤连蛋白2 | G蛋白激活内向钾通道5抗体 |
钙ATP酶SERCA蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 动物组织氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒 | 细胞超氧化物阴离子比色法定量pcr检测试剂盒 |
志贺氏菌菌体蛋白 | EIF2D蛋白抗体 |
钾离子通道蛋白16 | 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体 |
P170蛋白 | 程序性死亡配体1(CD274)抗体 |
脯羟化酶(prolyl hydroxylase)活性高效液相色谱定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Human HLA E乙醛脱氢酶家族3成员A1抗体 |
PE标记的血管紧张素转换酶2抗体 | 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体 |
关键字: HLA ;53.2 kDa; 22-305;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。