重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human Hsp40(重组人热休克蛋白40)是通过基因工程技术(通常在大肠杆菌表达系统中)生产的、与天然人源Hsp40蛋白结构功能相似的重组蛋白。该蛋白属于分子伴侣DnaJ家族,其核心功能是作为Hsp70的辅助伴侣蛋白,通过其保守的J-结构域与Hsp70相互作用,激活其ATP酶活性,从而协同参与细胞内新合成或变性蛋白的正确折叠、组装与转运,维持蛋白质稳态。
产品名 | Recombinant Human Hsp40 | 分子量 | 37.3 kDa |
表达区间 | 1-340 | 货号 | XG-DB2281 |
别名
DnaJ (Hsp40) homolog subfmaily B member 1, DNAJ 1, DNAJ B1, DnaJ heat shock protein family (Hsp40) member B1, DnaJ homolog subfamily B member 1, DnaJ protein homolog 1, DNAJ1, DNAJB 1, Dnajb1, DNAJB1 protein, DNJB1_HUMAN, HDJ 1, HDJ-1, HDJ1, Heat shock 40 kDa protein 1, Heat shock 40kD protein 1, Heat shock protein 40, Hsp 40, HSP40, HSPF 1, HSPF1, Human DnaJ protein 1, Radial spoke 16 homolog B
宿主; E.Coli
表达区间; 1-340
分子量; 37.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触结合蛋白14 | 一抗涂板(COATING)缓冲液 |
FAM123C蛋白 | 细胞PAR-2蛋白表达比色法定量酶联免疫试剂盒 |
通用腺病毒骨架载体(pAdEasy-1) | 载玻片细胞ER BETA 蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
体液科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定量PCR扩增pcr检测试剂盒 | 咖啡甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞甘油-3-磷酸脱氢酶-2(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 脑蛋白9抗体 |
高尔基体相关蛋白GCP372 | 低密度脂蛋白受体抗体 |
活性定量pcr检测试剂盒 | Karnovsky固着液 |
细胞组蛋白流式细胞仪pcr检测试剂盒 | 细胞脂蛋白脂酶活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
转录因子Ets差异基因5 | 异质核糖核蛋白M3-M4抗体 |
甲基样蛋白15 | APC标记人CD25单克隆抗体 |
PE标记人TCR γ/δ单克隆 | 磷酸化核仁蛋白C23抗体 |
AF680标记的帕金蛋白 | Recombinant Human Hsp40α-中连蛋白抗体 |
细胞硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 | KCNH6蛋白抗体 |
关键字: Hsp40;37.3 kDa; 1-340;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。