重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human HtrA1 (High-temperature requirement protein A1),即重组人源HtrA1蛋白,是一种在大肠杆菌(E. coli)中表达的重组人源蛋白,通常带有His标签,目标分子量约为24-28 kDa(具体大小取决于表达的片段,如aa 161-379)。该蛋白属于丝氨酸蛋白酶家族,是一种分泌型蛋白酶,兼具蛋白酶活性和分子伴侣功能,在细胞外基质重塑、信号通路调控及多种疾病的病理过程中扮演关键角色。
产品名 | Recombinant Human htrA1 | 分子量 | 25.6 kDa |
表达区间 | 161-379 | 货号 | XG-DB2294 |
别名
ARMD7, CARASIL, High-temperature requirement A serine peptidase 1, HtrA, HtrA serine peptidase 1, HTRA1, HTRA1_HUMAN, IGFBP5 protease, L56, ORF480, protease serine 11, Protease serine 11 (IGF binding), PRSS11, Serine protease 11, Serine protease HTRA1, Serine protease HTRA1 precursor
宿主; E.Coli
表达区间; 161-379
分子量; 25.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触囊泡蛋白 | 细菌铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
连接介导调节蛋白 | 甲酸化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒 |
冰冻切片组织组蛋白NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞BAX蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
细胞MET激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 细胞一氧化氮合成酶总活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
饮料D-葡萄糖酸内脂比色法定量pcr检测试剂盒 | α2巨球蛋白(α-2M)抗体 |
肝素辅助因子II | HLA DPB1抗体 |
细胞DAP KINASE蛋白表达比色法定量pcr检测试剂盒 | 组织GSK3激酶总活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
细胞糖胺多糖(GAG)总含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量pcr检测试剂盒 | 核抗原-FITC标记法细胞凋亡pcr检测试剂盒 |
肿瘤转移抑制基因H4 | FAM188B2蛋白抗体 |
基质金属蛋白酶-2 | 酶动力蛋白2抗体 |
PE标记人CD161单克隆 | 电导钙激活钾通道蛋白1抗体 |
植物质粒菌化试剂盒 | Recombinant Human htrA1异柠檬酸脱氢酶3 beta亚基抗体 |
细胞分裂周期蛋白23重组兔单克隆抗体 | APC标记人CD127 (IL7R)单克隆抗体 |
关键字: htrA1;25.6 kDa; 161-379;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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