重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human IGFBP5(重组人胰岛素样生长因子结合蛋白5)是一种通过基因工程技术在哺乳动物细胞表达系统中生产的重组蛋白,其氨基酸序列为Leu21-Glu272,并在C端融合了His标签。该蛋白经冻干处理,纯度超过95%,主要用于科学研究。
产品名 | Recombinant Human IGFBP5 | 分子量 | 49.2 kDa |
表达区间 | 21-272 | 货号 | XG-DB2327 |
别名
IBP 5, IBP-5, IBP5, IBP5_HUMAN, IGF binding protein 5, IGF BP5, IGF-binding protein 5, IGFBP 5, IGFBP-5, IGFBP5, Insulin like growth factor binding protein 5, Insulin-like growth factor-binding protein 5
宿主; E.Coli
表达区间; 21-272
分子量; 49.2 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PINK1 | 组织EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
磷酸二酯酶4C | 全组织免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP间接酶联免疫试剂盒(含AP二抗) |
糖蛋白标准样品——辣根过氧化酶 | 石蜡切片组织P38蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞尿激酶(UROKINASE)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 植物甘肽还原酶活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
饮料D-苹果酸比色法定量pcr检测试剂盒 | α/β水解酶4抗体 |
干扰素相关发育调节蛋白1/神经生长因子诱导蛋白PC4 | L-型电压依赖型钙通道α抗体 |
石蜡切片组织TUBULIN蛋白表达荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 组织AMPK激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒 | 活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定试剂盒 |
组织蛋白酶z | DKK2抗体 |
肌营养蛋白δ/δ-sarcoglycan | 磷酸化原癌基因蛋白18抗体 |
RH家族B型糖蛋白RHBG | 二甲基化组蛋白H3K4抗体 |
植物根瘤原生质细胞分离试剂盒 | Recombinant Human IGFBP5乙酰胆碱酯酶相关蛋白抗体 |
线粒体裂变1蛋白重组鼠单克隆抗体 | B7H6蛋白抗体 |
关键字: IGFBP5;49.2 kDa; 21-272;
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西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。