重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human KLF4 (Krüppel-like factor 4) 是一种在大肠杆菌(E. coli)中表达的、带有 C 端 His 标签的人源重组蛋白,纯度超过 80%,通常以液体或冻干粉形式提供。该蛋白是一种锌指结构的转录因子,具有调控细胞增殖、分化、胚胎发育及 DNA 损伤应激反应等多种生物学功能,尤其在维持干细胞多能性和体细胞重编程(iPSC 诱导)中扮演关键角色。KLF4 的功能具有组织和细胞特异性,在不同肿瘤中既可作为抑癌基因(如肺癌),也可作为促癌基因(如肝癌),并
产品名 | Recombinant Human KLF4 | 分子量 | 39.6 kDa |
表达区间 | 350-513 | 货号 | XG-DB2461 |
别名
Endothelial Kruppel like zinc finger protein, Epithelial zinc finger protein EZF, EZF, GKLF, gut Kruppel-like factor, Gut-enriched krueppel-like factor, KLF, KLF4, KLF4_HUMAN, Krueppel-like factor 4, Kruppel like factor 4 (Epithelial zinc finger protein EZF) (Gut enriched Krueppel like factor), Kruppel like factor 4 (gut)
宿主; E.Coli
表达区间; 350-513
分子量; 39.6 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
髓鞘转录因子1 | CACNA1G基因甲基化程度定量分析试剂盒 |
D型阿片受体 | 细胞NF KAPPA B P50蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
甘露糖待测样品处理试剂盒 | 细胞CASPASE-2蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
酵母菌完全补充混合(CSM-HOPKINS)培养基 | 电泳分析试剂盒 |
细胞PRK2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 硫酸软骨素裂解酶抗体 |
钙结合蛋白Calponin | 单胺氧化酶B抗体 |
动物细胞β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量pcr检测试剂盒 | 植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量pcr检测试剂盒 |
同位素真菌/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒 | 组织RSK1激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
肿瘤坏死因子诱导蛋白3相互作用蛋白1 | 亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白抗体 |
肌浆/内质网钙ATP酶2 | Ⅹ型胶原抗体 |
PE-Cy5标记人CD38单克隆 | 跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体 |
丝裂原活化蛋白激酶2/ERK2单克隆 | Recombinant Human KLF4TRIM64蛋白抗体 |
通用型HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR | IGF2基因的互补基因1蛋白抗体 |
关键字: KLF4;39.6 kDa; 350-513;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。