产品介绍:
本试剂盒主要用于食品、药品、饲料等样品中马、驴源性成分的定性检测。
检测目标:马源性(Equus caballus)和驴源性(Equus asinus)特异性DNA片段。
产品名称 | 马、驴源性核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 货号 | AP3475 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
应用领域:
食品真实性鉴定:检测肉制品(如香肠、肉松)中是否存在非法掺假(如用马肉冒充牛肉,或用驴肉掺假),确保产品标签的真实性。
药品质量控制:专门用于阿胶等传统药材的原料筛查。根据药典规定,阿胶必须采用驴皮熬制,该试剂盒可有效鉴别原料真伪,防止马皮或杂皮混入。
饲料安全监测:检测饲料中是否违规添加了马、驴源性动物蛋白(如肉骨粉),防止非法添加及保障养殖安全。
进出口检验检疫:满足国际贸易中对动物源性成分标识的法规要求。
�� 检测原理
该试剂盒采用的是实时荧光定量PCR法(TaqMan探针法)。
技术核心:针对马和驴物种特异性的DNA序列(通常靶向线粒体基因,如CYTB、12S rRNA或D-loop区)设计特异性引物和探针。
多重检测:通常在一个反应体系中,利用不同荧光标记(如FAM和VIC/HEX)的探针同时检测马和驴的DNA,实现“一管双检”。
信号产生:在PCR扩增过程中,Taq酶会降解与模板结合的特异性探针,释放出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的累积情况,依据扩增曲线和Ct值判断结果。
�� 核心优势
高特异性:能精准区分马、驴源性成分与其他常见动物(如牛、羊、猪、鸡)的DNA,避免交叉反应。
高灵敏度:检测下限极低,根据相关标准(如GB/T 21107-2025),检出限可达 0.1% 的外源成分含量(部分试剂盒灵敏度可达10³ Copies/mL)。
快速高效:整个检测过程(包括核酸提取)通常可在2-3小时内完成,远快于传统的微生物培养法。
定性准确:通过扩增曲线的形态(S型曲线)和Ct值进行判断,结果客观、准确。
⚙️ 操作流程概览
样本前处理与DNA提取:从待测样品(肉糜、饲料粉、阿胶块、加工食品等)中提取总基因组DNA。
反应体系配制:将试剂盒中的预混液(含引物、探针、酶等)与提取的DNA模板在冰上混合配制。
上机扩增:将反应体系放入实时荧光PCR仪中,设置好程序(通常包括预变性95℃ 10分钟,随后40-45个循环的95℃ 15秒、60℃ 1分钟)。
结果判读:
阳性(含马/驴源):对应荧光通道(如FAM检测马,VIC检测驴)扩增曲线呈明显的“S”型,且Ct值 ≤ 35-40。
阴性(不含马/驴源):无扩增曲线,或Ct值 ≥ 40-45,或曲线为直线。
�� 相关标准与法规
国家标准:该检测方法有对应的国家标准支持,如GB/T 21107-2025《饲料中马、驴源性成分的测定》,该标准于2026年1月1日实施,其中明确规定了实时荧光PCR法的检测流程。
国际标准:针对驴源性成分的检测,也有ISO/TS 20224-7:2020标准可供参考。
⚠️ 注意事项与局限性
防污染:必须严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染导致假阳性。
DNA质量:样品中残留的PCR抑制剂(如多糖、多酚、油脂)或DNA降解可能导致假阴性结果。
仪器依赖:必须使用带有荧光检测功能的实时荧光定量PCR仪(需支持FAM、VIC等多通道荧光检测)。
储存条件:试剂盒通常需在-20℃条件下避光保存,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
Toll样受体4相关蛋白抗体 | Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗体 |
磷酸化DDX58抗体 | 细胞角蛋白20抗体 |
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PCR试剂盒的核心类型
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
关键字: 马、驴;源性 ;核酸检测试剂盒; PCR-荧光探针法;
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