派琴虫核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） 新品

产品介绍：

该试剂盒主要用于检测水产养殖动物（如牡蛎、蛤蜊等双壳贝类）是否感染了派琴虫（Perkinsus spp.），这是一种引起贝类严重病害的原生动物寄生虫。

 �� 产品核心信息

检测对象：派琴虫（Perkinsus），主要包括引起牡蛎大规模死亡的海水派琴虫（Perkinsus marinus）或抗热派琴虫（Perkinsus olseni）。

检测原理：实时荧光定量PCR（qPCR），采用TaqMan荧光探针法。试剂盒利用特异性引物和探针靶向派琴虫的保守基因序列（如ITS区域或18S rRNA基因）进行扩增。

灵敏度与特异性：

高灵敏度：最低检测限通常可达 10-100 拷贝/μL，能够检测出极低感染量的样本。

高特异性：特异性≥99%，不会与宿主贝类基因组DNA或其他共栖微生物发生交叉反应。

适用样本：牡蛎、蛤蜊等贝类的鳃、外套膜、消化腺组织，或水体环境样本。

�� 产品组成与规格

组分名称  规格示例  说明

qPCR反应液 (2×Premix)  预混了dNTPs、缓冲液、Mg²⁺等核心成分。  部分产品将引物探针预混在内。

酶混合物 (Enzyme Mix)  含Taq DNA聚合酶，需-20℃保存。  对温度敏感，避免反复冻融。

阳性对照 (Positive Control)  含派琴虫目标基因片段的质粒DNA。  用于验证试剂有效性及制作标准曲线。

阴性对照 (Negative Control)  无菌双蒸水或缓冲液。  用于监控实验过程是否被污染。

引物/探针混合液  针对派琴虫保守序列设计。  探针通常标记FAM荧光基团。

�� 操作流程简述

样本采集与处理：

组织样本：取贝类的鳃组织或外套膜，加入PBS缓冲液进行研磨制成匀浆。

保存：若不能立即检测，样本应保存在-80℃或液氮中。

DNA提取：

使用商用基因组DNA提取试剂盒（柱提法/磁珠法）提取样本中的总DNA。

关键点：派琴虫是原生动物，细胞壁较厚，提取时需确保充分裂解。

试剂准备与加样：

将反应液和酶液在冰上解冻混匀。

按比例配制反应体系（通常为20-25 μL体系），向反应管中加入模板DNA（通常5-10 μL）。

必须设置：阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供）。

上机扩增：

将反应管放入荧光定量PCR仪。

推荐程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环反应：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（在此步收集荧光），进行40-45个循环。

技术优势对比

特性  PCR-荧光探针法 (TaqMan)  普通PCR (电泳法)  恒温扩增 (LAMP)

特异性  极高 (探针+引物双重识别)  中等 (易产生非特异条带)  高 (多组引物识别)

灵敏度  极高 (可检测低拷贝)  中等  高

定量能力  可定量 (Ct值反映感染程度)  仅定性  半定量

操作便捷性  需提取DNA，上机检测  需电泳，耗时长  操作简单，无需复杂仪器

适用场景  实验室确诊、流行病学调查  基础实验室筛查  现场快速筛查

公司正在出售的产品：

PCR（聚合酶链式反应）是一种基因扩增技术，

用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环（变性、退火、延伸）扩增目标基因片段，而非培养生物体。

关键点：

无需培养：PCR直接检测样本中的核酸，无需预先培养微生物或细胞。

应用场景：病原体检测（如病毒、细菌）、基因表达分析、遗传病诊断等。