大鼠颈动脉内皮细胞
产品信息：
产品名称 大鼠颈动脉内皮细胞
组织来源 颈动脉组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat carotid artery endothelial cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮样，多角形细胞 | 货号 | P-X1536 |
细胞简介：
细胞详述
颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉，前者分布至头顶部和颜面部，后者进入颅内分布至脑和眼眶内。
内皮细胞层是血液和其它组织的天然屏障。内皮细胞功能病变是造成动脉粥样硬化的主要原因。内皮细胞同时会合成和分泌凝血和纤维蛋白溶解系统的增强和抑制物，以及影响血小板粘附和聚集的媒介物。它们同时也会分泌控制细胞增殖的蛋白来维持血管壁的健康。
内皮细胞会分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及响应TNF-α，继而分泌细胞因子GM-CSF，表达ICAM-1表面抗体，产生大量的一氧化氮和endothelin。原代动脉内皮细胞的体外培养系统有助于在特定的体外条件下研究血管内皮细胞的功能。
细胞特性
1)组织来源于实验动物正常的颈动脉组织。
2)细胞鉴定：血小板-内皮细胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友病因子（vWF）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基：
我们推荐使用 Delf 原代内皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：
大鼠颈动脉内皮细胞是覆盖在大鼠颈动脉内壁的单层扁平上皮细胞，构成颈动脉的内膜。它可感知血流剪切应力和化学信号，分泌内皮调节因子调节血管张力和凝血功能，同时参与血管壁的炎症反应、血栓形成及血管生成过程，是研究动脉粥样硬化、脑缺血性疾病及血管损伤修复的重要细胞模型。
原代细胞传代：
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代，避免细胞过度汇合导致接触抑制，影响增殖能力
观察细胞状态：细胞形态正常，无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备：吸出旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞1-2次，去除血清（血清会抑制胰蛋白酶活性）
消化液选择：同原代分离，根据细胞类型选择合适的消化酶，胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟，胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止：显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，血清浓度不低于10%
细胞吹打：用移液器轻轻吹打细胞，避免过度用力导致细胞破裂，吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整：生长速度快的细胞（如成纤维细胞）可按1:3-1:6传代，生长速度慢的细胞（如内皮细胞、神经细胞）按1:2传代
首次传代比例可适当提高（如1:2），待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶，避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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收货与处理流程：
1. 收货检查
收到细胞后首先观察T25培养瓶瓶身是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有异常及时联系。
2. 细胞复苏（仅针对冻存细胞）
将冻存管迅速放入37℃温水中摇晃融化，时间约1分钟
加入4-5ml完全培养基混匀，1000RPM常温离心4-5分钟
弃去上清液，补加1-2ml培养液吹匀，移入含5ml培养基的培养瓶中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度
3. 新鲜细胞处理
用75%酒精消毒培养瓶瓶身，拆下封口膜
放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中静置3-4小时，稳定细胞状态后再进行后续操作
关键字： 大鼠颈动脉内皮细胞;上皮样，多角形细胞;贴壁;
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