大鼠脑血管成纤维细胞

大鼠脑血管成纤维细胞

产品信息：

产品名称 大鼠脑血管成纤维细胞

组织来源 正常脑组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

脑血管是由内膜、中层弹力层和外膜构成，三层紧密贴合在一起。其中，外膜是专门的支持组织，由结缔组织组成，主要成分是成纤维细胞，其在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。

细胞特性

1） 组织来源于实验动物的正常脑组织。

2） 细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。

3） 经鉴定细胞纯度高于90%。

4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5） 细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：

大鼠脑血管成纤维细胞是存在于大鼠脑血管外膜中的成纤维细胞，呈梭形或星形。它主要负责合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外基质，维持脑血管外膜的结构完整性，同时在脑血管损伤、炎症及动脉粥样硬化过程中可被激活，参与血管壁的重构和纤维化过程。
原代细胞传代：

传代时机判断

细胞汇合度达到80%-90%时进行传代，避免细胞过度汇合导致接触抑制，影响增殖能力

观察细胞状态：细胞形态正常，无明显漂浮、污染迹象

消化环节控制

消化前准备：吸出旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞1-2次，去除血清（血清会抑制胰蛋白酶活性）

消化液选择：同原代分离，根据细胞类型选择合适的消化酶，胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟，胶原酶消化时间为10-30分钟

消化终止：显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，血清浓度不低于10%

细胞吹打：用移液器轻轻吹打细胞，避免过度用力导致细胞破裂，吹打次数一般为10-15次

传代比例控制

传代比例根据细胞生长速度调整：生长速度快的细胞（如成纤维细胞）可按1:3-1:6传代，生长速度慢的细胞（如内皮细胞、神经细胞）按1:2传代

首次传代比例可适当提高（如1:2），待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例

传代后培养

接种后轻轻晃动培养瓶，使细胞均匀分布，放入培养箱中培养

24小时内不要晃动培养瓶，避免细胞贴壁不牢

培养24-48小时后观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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细胞分离与接种：

酶消化的“度”：酶液浓度和消化时间需精准控制，如胰蛋白酶浓度通常为0.25%，消化时间5-15分钟（根据组织类型调整），消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器，镜下观察到细胞变圆、间隙增大时，立即加入含血清的培养基终止消化。

吹打力度适中：用巴氏吸管吹打细胞悬液时，避免用力过猛产生大量气泡，以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜，一般吹打10-15次即可，过度吹打会导致细胞膜破裂。

接种密度适配：根据细胞增殖速度调整接种密度，增殖快的细胞（如成纤维细胞）可适当降低密度，增殖慢的细胞（如神经元）需提高接种密度，确保细胞能相互支持生长。