大鼠少突胶质细胞
产品信息:
产品名称 大鼠少突胶质细胞
组织来源 正常脑组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat Oligodendrocytes | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 圆形或椭圆形细胞 | 货号 | P-X1707 |
细胞简介:
细胞详述
少突胶质细胞是zhong枢神经系统中胶质细胞的重要组成部分,其主要功能是包绕神经元的轴突形成髓鞘,协助神经电型号的跳跃式高效传递,维持和保护神经元的正常功能。此外,少突胶质细胞还具有合成和分泌多种细胞因子来促进神经元、神经胶质细胞的发育和存活等功能。
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常脑组织。
2) 细胞鉴定:MBP免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:圆形或椭圆形细胞,贴壁培养。
产品定义:
大鼠少突胶质细胞是存在于大鼠中枢神经系统中的一种胶质细胞,其主要功能是为神经元轴突提供髓鞘包裹,形成绝缘的髓鞘结构,可加快神经冲动的传导速度,同时对神经元轴突具有营养支持和保护作用,在多发性硬化症等脱髓鞘疾病及神经损伤修复研究中具有重要意义。
原代细胞分离:
组织取材
无菌操作是底线:取材前对动物/组织进行严格消毒,全程在超净台内操作,所有工具提前灭菌
新鲜度决定活性:取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中,30分钟内完成分离,若无法即时处理,可暂存于4℃冰箱(不超过24小时)
精准取材:避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织,比如分离肝细胞时要剔除胆囊,分离神经细胞时要去除脑膜
组织处理
机械法:通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织,适用于结缔组织较少的组织(如肝脏、肾脏),注意力度适中,避免过度研磨损伤细胞
酶解法:根据组织类型选择合适的酶:
胰蛋白酶:适用于消化上皮组织、肝、肾等,浓度0.25%-0.5%,消化时间15-30分钟,37℃
胶原酶:适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等,浓度0.1%-0.3%,消化时间1-4小时,37℃,可加入EDTA增强效果
透明质酸酶:常与胶原酶联用,消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织
联合法:机械剪碎后再进行酶解,兼顾效率与细胞活性
细胞筛选与纯化
过滤:使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织块
离心:800-1200RPM离心5-8分钟,弃上清后用PBS重洗2-3次,去除细胞碎片和酶液
特异性纯化:使用差速贴壁法(利用不同细胞贴壁速度差异)、密度梯度离心法(如Percoll、Ficoll)、免疫磁珠分选或流式细胞术,获得高纯度目标细胞
公司正在出售的产品:
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杂交瘤细胞株;5M7 | 口蹄疫病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
杂交瘤细胞株;YD8 | 无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
杂交瘤细胞株;3M4 | 柯萨奇病毒A24型变种探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
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原代细胞实验注意事项:
取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好,冰上操作,减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0~P3,代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀,太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键,宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止,过度消化必死一批。
吹打轻柔,避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次,换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门,不反复观察、不反复拿进拿出,温度、pH 波动对原代杀伤极大。
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