大鼠髓核细胞

大鼠髓核细胞

产品信息：

产品名称 大鼠髓核细胞

组织来源 正常椎间盘组织
种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介：

细胞详述

髓核是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。髓核细胞的过早衰老与凋亡是导致椎间盘退行性变过程的主要原因之一，主要表现为退变椎间盘内髓核细胞功能降低和数量减少，使得其 Ⅱ型胶蛋白聚糖等基质分泌量下降，终导致椎间盘维持脊柱高度、承受各方应力等生物力学功能丧失。

细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。

2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：梭形或多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代软骨 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：

大鼠髓核细胞是存在于大鼠椎间盘髓核中的软骨样细胞，呈圆形或椭圆形。它可合成和分泌蛋白多糖、胶原蛋白等细胞外基质，维持髓核的弹性和水分含量，在椎间盘的压力缓冲和脊柱运动功能中发挥关键作用，是研究椎间盘退变、腰椎间盘突出症及椎间盘组织工程的重要细胞模型。
操作过程：

组织消化的细节：

分阶段消化：对于致密组织（如肾脏、乳腺），可先剪碎至1mm³左右的小块，用PBS清洗2-3次去除血液和杂质，再进行酶消化，避免杂质影响酶的活性。

间歇振荡消化：消化过程中可将培养瓶置于摇床上，以60-80rpm的速度轻微振荡，促进酶与组织充分接触，提高消化效率。

细胞计数与接种：

计数前混匀：细胞悬液需充分混匀后再取样计数，避免细胞沉降导致计数误差；计数时至少计数2个方格，取平均值提高准确性。

接种后静置：细胞接种后将培养瓶置于培养箱内静置2-4小时，期间不要晃动，让细胞自然贴壁，之后再轻轻更换培养位置。

换液与传代的技巧：

换液留底液：换液时不要完全倒掉旧培养基，可保留10%左右的底液，减少细胞环境的突变，帮助细胞适应新培养基。

传代避免过度消化：原代细胞对胰蛋白酶更敏感，传代时消化时间比传代细胞短2-3分钟，镜下观察到细胞边缘收缩、开始脱落时即可终止消化。
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原代细胞实验常见问题：

污染防控：实验全程严格无菌操作，超净工作台使用前紫外消毒30分钟，实验用品需高压灭菌；定期对培养箱、水浴锅等设备进行清洁和消毒，避免细菌、真菌、支原体污染。

细胞老化与分化：原代细胞传代次数有限，通常传至3-5代后会出现老化，需及时冻存早期代次细胞；培养过程中避免过度传代、营养缺乏、环境刺激等因素，防止细胞自发分化。

实验重复性保障：每次实验使用同一来源、同一代次的细胞，严格控制实验条件（如培养基批次、消化时间、培养时间等），设置足够的重复样本，减少实验误差。