大鼠脂肪血管基质细胞
产品信息:
产品名称 大鼠脂肪血管基质细胞
组织来源 正常脂肪组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Primary adipose vascular stromal cells in rats | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 长梭形细胞,不规则细胞 | 货号 | P-X1680 |
细胞简介:
细胞详述
脂肪血管基质组分( stromal vascular fraction,SVF)即脂肪组织去除成熟脂肪细胞后,所获得的具有干
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常脂肪组织。
2) 细胞鉴定: CD44免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
推荐使用 delf原代间充质干 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
产品定义:
大鼠脂肪血管基质细胞(SVF)是大鼠脂肪组织去除成熟脂肪细胞后获得的具有干细胞特性的混合细胞群体,主要为长梭形贴壁细胞,可通过CD44免疫荧光染色鉴定。该细胞群体包含脂肪源性间充质干细胞、内皮祖细胞、巨噬细胞等多种细胞类型,具有自我更新和多向分化潜能,可分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞等,在脂肪组织再生、骨缺损修复及免疫调节研究中具有重要应用价值。
原代细胞实验要点:
一、取材与分离
新鲜、无菌:组织离体越快越好,全程冰上操作。
去除杂质:剔除脂肪、结缔组织、血污,减少污染和消化干扰。
温和消化:
控制酶浓度、温度、时间
及时终止消化,避免细胞过度损伤
过筛过滤:去除组织块,获得单细胞悬液。
二、接种与培养
密度关键:原代细胞普遍怕稀,密度太低不贴壁、不长。
完全贴壁后再换液:刚接种别乱动。
专用培养基:
内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基
血清质量影响极大,建议批次验证
CO₂、湿度、温度严格稳定,避免频繁开关门。
三、传代与冻存
不要等太满:汇合度 70%–80% 就传,不要等到堆积。
消化监控:镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。
冻存保护:
标准:90% 血清 + 10% DMSO
程序降温,尽快转入液氮
原代细胞冻存复苏能力弱,尽量早冻、多冻。
四、污染与状态判断
一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒:直接丢弃,不要救。
细胞状态好:
形态均一、轮廓清晰
生长均匀、无局部堆积
出现分化、拉长、多核、空泡多:说明老化 / 状态差,不建议继续实验。
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冻存复苏:
冻存的梯度降温:
逐步降温:细胞冻存时,先在4℃放置30分钟,再在-20℃放置1小时,随后转移至-80℃冰箱过夜,最后放入液氮长期保存,避免温度骤变导致细胞内冰晶形成。
标记清晰:冻存管上需标记细胞名称、代次、冻存日期和操作者姓名,避免后续复苏时混淆。
复苏的快速操作:
解冻后立即离心:细胞解冻后迅速转移至含预热培养基的离心管中,离心去除含DMSO的冻存液,减少DMSO对细胞的毒性。
复苏后静置培养:复苏后的细胞接种后,24小时内不要换液,让细胞有足够的时间恢复状态,24小时后再更换新鲜培养基。
关键字: 大鼠脂肪血管基质细胞;长梭形细胞,不规则细胞; 贴壁;
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