大鼠椎体终板软骨干细胞
产品信息:
产品名称 大鼠椎体终板软骨干细胞
组织来源 脊椎组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Primary rat vertebral endplate chondrostem cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 梭形,不规则细胞 | 货号 | P-X1678 |
细胞简介:
细胞详述
椎体终板软骨干细胞属于成体干细胞的一种,具有单克隆形成能力,以及成骨、成脂与成软骨分化的重要特性。
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的脊椎组织。
2) 细胞鉴定:CD44或CD90免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:梭形,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
推荐使用 delf原代间充质干 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
产品定义:
大鼠椎体终板软骨干细胞是存在于大鼠椎体终板软骨中的一种干/祖细胞,具有自我更新和分化为软骨细胞的能力。它可参与椎体终板软骨的发育、生长及损伤修复,维持椎体终板的结构和功能,在椎间盘退变、椎体终板炎及脊柱疾病研究中具有重要作用,是脊柱组织工程的潜在细胞来源。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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原代细胞纯化与鉴定:
纯化方法:
差速贴壁法:利用不同细胞贴壁速度差异,如成纤维细胞贴壁快,上皮细胞贴壁慢,在接种后1-2小时移除未贴壁细胞,可初步分离不同细胞类型。
免疫磁珠分选法/流式细胞术:针对特定细胞表面标志物,利用特异性抗体标记细胞,通过磁珠或流式分选仪分离目标细胞,纯度可达90%以上。
鉴定手段:通过形态学观察(原代细胞形态多样,与传代细胞有差异)、免疫细胞化学染色、RT-PCR检测特异性基因表达等方法,确认目标细胞的纯度和身份。
关键字: 大鼠椎体终板软骨干细胞;梭形,不规则细胞;贴壁;
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