大鼠肝卵圆细胞

产品定义：

大鼠肝卵圆细胞是存在于大鼠肝脏胆管内的一种肝干/祖细胞，具有自我更新和多向分化潜能。在肝脏严重损伤且肝细胞增殖受抑制时，肝卵圆细胞可被激活，增殖并分化为肝细胞和胆管上皮细胞，参与肝脏的损伤修复，是研究肝脏再生机制、肝干细胞移植及肝病细胞治疗的重要细胞模型。

产品简介：

细胞详述

肝卵原细胞是肝脏中一种具有强大增值能力和分化潜能的干细胞，在肝脏发生损伤和缺失后，肝脏之所以有强大的再生和修复能力是肝脏中干细胞发挥作用。在肝脏受到严重急性损伤时，肝卵圆细胞被活化，可以分化为肝实质细胞和肝内胆管上皮等多种功能性细胞，修复肝脏的损伤。

肝卵圆有肝内和肝外两个来源。此外肝卵圆细胞与原发性肝癌的发生也有着密切的关系，对肝卵圆细胞的研究在多个方面都有着重要的意义。

细胞特性

1) 组织来源于处理后大鼠的肝组织。

2) 细胞鉴定：c-kit或AFP免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式：多角形细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代肝卵圆 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。
细胞消化与传代：

方法一：利多卡因消化法

吸出培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞1次

添加1ml 12mM利多卡因消化液，轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底，37℃温浴3-5分钟

显微镜下观察到细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基稀释消化液

轻轻吹打混匀细胞，1200rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬接种

方法二：胰酶消化法

若利多卡因消化效果不佳，可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重复上述操作，消化时间控制在1-2分钟

方法三：细胞刮取法

若细胞仍无法消化，加入3ml完全培养基终止消化，用无菌细胞刮轻轻刮取细胞（此方法易造成细胞机械损伤，不推荐）

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