重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白属于蛋氨酸氨肽酶家族(MetAP),是一种线粒体定位的酶(也称Methionine aminopeptidase 1D, mitochondrial),其核心功能是催化新生肽链N端的蛋氨酸切除,这一过程对蛋白质的正确折叠、稳定性及亚细胞定位至关重要。与经典的细胞质或线粒体基质MetAP不同,MAP1D在底物特异性或金属离子依赖性(如钴、锌、锰离子)上可能具有独特性。研究表明,MAP1D在结肠癌细胞系及肿瘤组织中呈现异常高表达,且其表达水平与肿瘤的发生发展密切相关,通过shRNA技术敲低MAP1D可显
产品名称; Recombinant Human MAP1D
别名; AMP1D_HUMAN, CDS of metAP 3 within PCR fragment, M ethionine aminopeptidase 1D, mitochondrial precursor, MAP 1D, MAP1D, MetAP 1D, Metap1l, Methionine aminopeptidase 1D, Methionine aminopeptidase 1D, mitochondrial, Methionyl aminopeptidase type 1D (mitochondrial), Methionyl aminopeptidase type 1D, mitochondrial, mitochondrial, Peptidase M 1D
宿主; E.Coli
表达区间; 20-335
分子量; 34.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
透明质酸酶4 | 蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)鉴定 |
磷酸化干扰素α/β受体1 | TEM电镜石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP完全间接酶联免疫试剂盒 |
DICER酶基因敲除试剂盒 | 石蜡切片组织CASPASE-8蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
植物钙ATP酶(Ca++ -ATPase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 全组织非特异性酯酶(Non-specific esterase)活性染色 |
酒类丙三醇比色法定量pcr检测试剂盒 | 白细胞介素-10抗体 |
海马钙蛋白样4多肽 | KIAA1614蛋白抗体 |
细胞GSK-3BETA蛋白表达荧光定量pcr检测试剂盒 | 真菌/酵母碱性焦磷酸酶(Alkaline Pyrophosphatase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
通用型牛钩端螺旋体(L. hardjo)基因pcr检测试剂盒 | 膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒 |
转运蛋白SC24C | FAM家族蛋白40A抗体 |
结构蛋白家族3 | 脑蛋白9抗体 |
PE标记人CD106单克隆 | 电压门控钾通道亚基Kv7.3抗体 |
细胞培养污染性支原体属(Mycoplasma)鉴定 | Recombinant Human MAP1D胰腺弹性蛋白酶3A抗体 |
AF750标记的TRIM31抗体 | Bcl-2抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: MAP1D;34.7 kDa; 20-335;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。