重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白是一种线粒体NADP⁺-依赖性苹果酸酶,在细胞代谢中发挥关键作用,催化苹果酸氧化脱羧生成丙酮酸、NADPH和CO₂,为脂肪酸和胆固醇的生物合成提供还原力。ME3与ME1、ME2同属苹果酸酶家族,但其活性不受变构调节,具有相对稳定的四聚体结构。研究表明,ME3在胰腺癌等多种肿瘤中表达,其特异性抑制剂(如6-哌嗪-1-基吡啶-3-醇酰胺类似物)正在被探索作为潜在的抗癌药物。
产品名称; Recombinant Human ME3
别名; Malate dehydrogenase, Malic enzyme 3, Malic enzyme 3, NADP(+) dependent, mitochondrial, NADP ME, NADPME, Pyruvic malic carboxylase
宿主; E.Coli
表达区间; 24-590
分子量; 62.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
微管相关蛋白α6 | 细胞长链脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE) |
磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白 | 体液肌酸激酶(CK)活性酶动力比色法定量酶联免疫试剂盒 |
RNA样品储存液 | 细胞铜离子浓度比色法定量酶联免疫试剂盒 |
组织脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE) | 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性终点比色法定量酶联免疫试剂盒 |
植物叶绿体外膜脂质薄层色谱(TLC)分析pcr检测试剂盒 | 氨基丁酸转运蛋白VGAT抗体 |
胱氨酸 | LUC7L2蛋白抗体 |
载玻片细胞AKT蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞组织C(CATHEPSIN C)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
通用型马铃薯X病毒(Potato Virus X;PVX)基因pcr检测试剂盒 | 动物软骨组织细胞分离培养试剂盒 |
组织蛋白酶D重链 | FITC标记人CD69单克隆抗体 |
甲酸基肽受体1 | 鸟嘌呤核苷酸交换因子RGNEF抗体 |
Rho GTP酶激活蛋白13 | 脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体 |
糖类总量硫酸-苯酚比色法定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Human ME3胰岛素原抗体 |
小鼠抗人CD19单克隆抗体 | 5-羟色胺受体1D抗体 |
关键字: ME3;62.3 kDa; 24-590;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。