重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人NANS(N-乙酰神经氨酸合酶),又称唾液酸合酶(SAS),是一种在大肠杆菌等表达系统中制备的重组蛋白,通常在其N端带有一个His标签。该酶是唾液酸生物合成途径中的关键酶,能够催化生成N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和2-酮-3-脱氧-D-甘油-D-半乳糖-壬酸(KDN)。N-乙酰神经氨酸作为一种重要的唾液酸,是多种糖蛋白和糖脂的组成部分,在细胞信号传递、免疫反应和神经发育等生物过程中发挥着不可或缺的作用。重组人NANS蛋白(氨基酸Met1-Ser359)纯度超过90%,广泛用于糖生物学、神经发育障
产品名称; Recombinant Human NANS
别名; EC 2.5.1.56, EC 2.5.1.57, N acetylneuraminate 9 phosphate synthase, N acetylneuraminate synthase, N acetylneuraminic acid phosphate synthase, N acetylneuraminic acid synthase, N-acetylneuraminate synthase, N-acetylneuraminate-9-phosphate synthase, N-acetylneuraminic acid phosphate synthase, N-acetylneuraminic acid synthase, NANS, OTTHUMP00000021769, SAS, Sialic acid phosphate synthase, Sialic acid synthase
宿主; E.Coli
表达区间; 1-359
分子量; 39.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
维甲酸调节核基质相关蛋白 | P11-12显色(SULFO ORANGE)指示溶液 |
磷酸核糖焦磷酸合成酶2 | 人体Hemoglobin E RFLP基因分析试剂盒 |
细胞乙酰化组蛋白H4染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒 | COLLAGEN III蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
组织5-焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶(mevalonate 5-pyrophosphate decarboxylase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞糖原硫酸蒽酮比色法定量酶联免疫试剂盒 |
面食比色法定量pcr检测试剂盒 | VWCE抗体 |
含普列克底物蛋白家族F成员2 | KIAA1024蛋白抗体 |
细胞IGF 蛋白表达比色法定量pcr检测试剂盒 | 组织Akt1/PKBa激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
体液胱(cystine)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | EDTA钠血液抗凝液 |
转导素β1X连锁受体蛋白1 | FAM26E蛋白抗体 |
脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin4 | 内皮分泌蛋白SCUBE2抗体 |
ras癌基因家族Rab5蛋白 | 二氢嘧啶脱氢酶抗体 |
肠毒素A(Staphylococcus aureus : enterotoxin A)鉴定16S rDNA PCR扩增pcr检测试剂盒 | Recombinant Human NANS乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白9抗体 |
AF750标记的软骨蛋白聚糖抗体 | alpha干扰素诱导蛋白27抗体 |
关键字: NANS;39.4 kDa; 1-359;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。