操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
该蛋白是一种关键的泛素样结合酶，核心功能是作为 NEDD8 的 E2 结合酶，参与蛋白质的 neddylation（类泛素化）修饰过程。它与 E1 激活酶（UBA3-NAE1）和 E3 连接酶（如 RNF7/RBX2）协同作用，特异性地将 NEDD8 蛋白转移至靶蛋白 Cullin-5 (CUL5) 上。这一修饰对 Cullin-RING 泛素连接酶复合物的激活至关重要，进而调控细胞周期、信号转导及蛋白质降解等过程。研究表明，UBE2F 的异常表达与肺癌、神经退行性疾病等密切相关。
产品名 | Recombinant Human NCE2 | 分子量 | 20.2 kDa |
表达区间 | 1-185 | 货号 | XG-DB2731 |
别名
NCE2, NEDD8 carrier protein UBE2F, NEDD8 conjugating enzyme, NEDD8 conjugating enzyme UBE2F, NEDD8 protein ligase UBE2F, NEDD8-conjugating enzyme 2, NEDD8-conjugating enzyme UBE2F, ube2f, UBE2F_HUMAN, Ubiquitin conjugating enzyme E2F, Ubiquitin conjugating enzyme E2F (putative), Ubiquitin-conjugating enzyme E2 F
宿主; E.Coli
表达区间; 1-185
分子量; 20.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品：
糖皮质激素区域表达蛋白16 | 体液EBV（EPSTEIN-BARR）病毒定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
赖氨酸特异性去甲基酶5B | TEM电镜免疫细胞化学HRP酶联DAB间接酶联免疫试剂盒（含HRP二抗） |
核酸－蛋白结合凝胶迁移电泳分析（EMSA）试剂专题 | 载玻片细胞PDGF-A蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞PKG激酶总活性定量pcr检测试剂盒（A/B/C） | 血液结构型神经元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
土壤α活性DNS比色法定量pcr检测试剂盒 | T淋巴细胞激活蛋白6E抗体 |
干扰素α11 | ICEBERG蛋白抗体 |
冰冻切片组织钙ATP酶SERCA蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 组织CASEIN KINASE 1激酶活性定量pcr检测试剂盒（A/B/C） |
体液（folic acid）含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 大量全血基因组DNA纯化试剂盒（20毫升全血） |
转化生长因子β活化激酶结合蛋白1 | ESF1蛋白抗体 |
角蛋白相关蛋白19.4 | 鸟氨酸脱羧酶抗酶2抗体 |
PE标记人CD40单克隆 | 多巴胺转运蛋白DAT抗体 |
通用型HCV亚型（HEPATITIS VIRUS C）病毒定量PCR扩增 | Recombinant Human NCE2异质核糖核蛋白M3-M4抗体 |
AF680标记的骨成型蛋白受体1A抗体 | ATP依赖解螺旋酶ETL1抗体 |
重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： NCE2;20.2 kDa; 1-185;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。