重组蛋白(Recombinant Protein):

是指利用重组DNA或RNA技术,在体外人工制造的蛋白质。
这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段,插入到重组表达载体中,然后导入宿主细胞(如细菌、酵母、哺乳动物细胞等),
利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。
产品概述:

人源重组p27 KIP1(Recombinant Human p27 KIP1)是一种在实验室中通过重组DNA技术表达的、与人体内天然p27蛋白结构一致的蛋白质。它由CDKN1B基因编码,是一种关键的细胞周期依赖性激酶抑制因子,主要通过与CDK2-cyclin E等复合物结合来抑制其活性,从而在G1期向S期转换的检查点处发挥“刹车”作用,负向调控细胞周期进程。研究表明,p27 KIP1在多种肿瘤中表达下调,其水平与肿瘤的恶性程度和预后密切相关,因此在肿瘤发生机制研究和药物开发中备受关注。
产品名 | Recombinant Human p27 KIP 1 | 分子量 | 21.7 kDa |
表达区间 | 1-198 | 货号 | XG-DB2876 |
别名
AA408329, AI843786, Cdki1b, CDKN 1B, CDKN 4, CDKN1B, CDKN4, CDN1B_HUMAN, Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1B, Cyclin dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B (p27, Kip1), Cyclin-dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor p27 Kip1, KIP 1, KIP1, MEN1B, MEN4, OTTHUMP00000195098, OTTHUMP00000195099, p27, p27 Kip1
宿主; E.Coli
表达区间; 1-198
分子量; 21.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

铜代谢结构域蛋白10 | 抗体稀释缓冲液 |
FAM125A蛋白 | AKT蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
调料D-葡萄糖酸内脂比色法定量pcr检测试剂盒 | 载玻片细胞ER BETA 蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
5183-AD-1电转感受态细菌 | 血液牛病毒性腹泻病毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1)定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
组织IKKα激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体 |
干扰素诱导蛋白AIM2 | 蛋白质单ADP核糖基转移酶PARP4抗体 |
细胞/组织活性高尔基体分离试剂盒 | B5固着液 |
石蜡切片组织组蛋白荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 组织PYK2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
转录因子同源蛋白Nkx6.3 | 乙酰化细胞核因子(K314/K315)单克隆抗体 |
甲状腺激素受体相关蛋白3 | APC标记人CD123单克隆抗体 |
PE标记小鼠CD102单克隆 | 磷酸二酯酶7B抗体 |
AF680标记的脑源神经营养因子 | Recombinant Human p27 KIP 1α-乳清蛋白抗体 |
PH0-2显色(BRILLIANT GREEN)指示溶液 | KHSRP蛋白抗体 |
操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
关键字: p27 KIP 1;21.7 kDa; 1-198;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。