血锌浓度检测试剂盒(PAPS法)说明书
微量法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
锌是一种必需的微量金属,仅次于铁。它存在于锌金属酶中,例如碳酸酐酶、碱性磷酸酶、R.N.A和D.N.A聚合酶、噻啶激酶、羧肽酶和醇脱氢酶。人类缺乏锌可能导致儿童皮肤病变、易怒、脱发和生长迟缓。锌不足与免疫功能受损有关。
测定原理:
硝基-PAPS 在碱性溶液中与 Zn 反应,生成紫色的复合物,在570nm处有最大的吸收峰。Cu 和铁离子的干扰可以通过调节pH值和添加鏊合物完全消除,
组成:
产品名称 | IS028-50T/48S | IS028-100T/96S | Storage |
试剂一:液体 | 6ml | 12ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 2ml | 4ml | 4℃,避光 |
标准液:液体 | 0.2ml | 0.4ml | 4℃,避光 |
说明书 | 一份 |
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自备仪器和用品:
酶标仪、离心机、可调式移液枪、96孔板、蒸馏水。
样本制备:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免样本和试剂浪费!
1.血清:标本4℃保存可稳定一周。
2.样本中甘油三酯≤1000mg/dL、胆红素≤50mg/dL、VC≤100mg/dL、Cu²*≤60μmol/L、Fe³*≤60μmol/L、Ca²≤5mmol/L、Mg²≤4mmol/L时未观察到明显干扰。
上机检测:
1. 酶标仪预热30 min,调节波长到570nm。
2.提前取出所有试剂,解冻至室温,在96孔板中依次加入:
试剂名称(μl) | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本 | 80 |
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标准液 |
| 80 |
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蒸馏水 |
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| 80 |
试剂一 | 120 | 120 | 120 |
混匀后,37℃孵育5min。 |
试剂二 | 40 | 40 | 40 |
混匀,37℃孵育 10min 后取出200μl置96孔板中于 570nm 处读取吸光值 A。 |
注:1.若A测定值大于1.5,可用生理盐水或蒸馏水对样本进行稀释,稀释倍数D代入计算公式。
2.若ΔA(A测定管-A空白管)值小于0.08,可增加样体积V1(如由80μl增至100μl,空白管由80μl增加至100μl,标准管是80μl标准品和20μl蒸馏水;其他试剂均保持不变)。则改变后的V1代入公式重新计算。
3. 检测出的ΔA(A测定管-A空白管)应在0.8--0.0.08线性范围之间,结果较为准确。
血锌浓度计算公式:
血锌(Zn)(μmol/L) = (C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
= 36.7×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
血锌(Zn)(μg/dL) = (C 标准×V2)×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷V1×6.51×D
= 238.9×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×D
C 标准--标品浓度,36.7μmol/L; V1--加入样本体积,0.08mL;V2--加入标准品体积,0.08mL; W--质量,g; D--稀释倍数,未稀释即为 1。
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