重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human P65(又称 RELA)是指利用重组DNA技术(通常在大肠杆菌表达系统)生产的人源核因子κB亚基p65(NF-κB p65)。该蛋白是一种关键的转录因子,作为NF-κB信号通路的核心成员,通常以带有GST或His标签的高纯度形式提供,广泛用于免疫学、细胞凋亡及炎症反应研究,通过与p50亚基形成异源二聚体,调控特定基因的表达,在细胞应对外界刺激(如细胞因子或病原体)时发挥至关重要的信号传导作用。
产品名 | Recombinant Human P65 | 分子量 | 45.4 KDa |
表达区间 | 1-220 | 货号 | XG-DB2884 |
别名
NFKB 3, NFKB p65, NFKB3, p65, RELA, Transcription factor p65
宿主; E.Coli
表达区间; 1-220
分子量; 45.4 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
微管动力调节蛋白FAM82A | 细菌5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性 |
磷酸化p21蛋白 | 通用型低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量酶联免疫试剂盒 |
10%蛋白电泳分离预制胶溶液 | 细胞CDK3蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
植物镁ATP酶(Mg++ -ATPase)活性比色法定量 | 冰冻切片糖原(DIASTASE)法染色试剂盒 |
人体细胞N-乙酰转移酶2(NAT2)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | β内酰胺酶样蛋白抗体 |
谷氨酸受体红藻氨酸离子3/谷氨酸受体7 | KI2LA蛋白抗体 |
HISTONE H3蛋白表达ELISA定量pcr检测试剂盒 | 体液尿激酶(UROKINASE)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
石蜡切片脂质尼罗红直接染色试剂盒 | 动物细胞核分离试剂盒 |
转录因子ETV7 | FAM194A蛋白抗体 |
脊髓灰质炎病毒受体相关结构域蛋白 | 脑血管内皮细胞粘附分子1抗体 |
PPEF1蛋白 | 毒蕈碱样蛋白3抗体 |
体液EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human P65有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体 |
AF750标记的磷酸化转化生长因子β活化激酶1抗体 | A型流感病毒(H9N2)血凝素HA1抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: P65;45.4 KDa; 1-220;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。