重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human PKM2 是指通过重组 DNA 技术(通常在大肠杆菌表达系统)生产的人源丙酮酸激酶 M2 型(Pyruvate Kinase M2)。该蛋白是糖酵解途径的关键限速酶,具有独特的“分子开关”功能,能在高活性的四聚体(促进能量生成)和低活性的二聚体(促进生物合成)之间动态切换,这种可塑性使其成为肿瘤代谢重编程(瓦尔堡效应)的核心调控因子;除了经典的代谢功能,PKM2 还能进入细胞核作为蛋白激酶或转录共激活因子,直接调控 HIF-1α、β-catenin 等促癌基因的表达。其
产品名 | Recombinant Human PKM2 | 分子量 | 21.9 kDa |
表达区间 | 35-221 | 货号 | XG-DB3015 |
别名
CTHBP, Cytosolic thyroid hormone binding protein, Cytosolic thyroid hormone-binding protein, KPYM_HUMAN, MGC3932, OIP 3, OIP-3, OIP3, OPA interacting protein 3, Opa-interacting protein 3, p58, PK muscle type, PK, muscle type, PK2, PK3, PKM, PKM2, pykm, Pyruvate kinase 2/3, Pyruvate kinase 3, Pyruvate kinase isozymes M1/M2, Pyruvate kinase muscle, Pyruvate kinase muscle isozyme, pyruvate kinase PKM
宿主; E.Coli
表达区间; 35-221
分子量; 21.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
碳水化合物磺基转移酶2 | 膜相关结构免疫化学固着溶液 |
EOS蛋白 | 冰冻切片组织CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
血液乳糖含量酶连续反应光谱法定量pcr检测试剂盒 | RyR受体蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
通用型HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒 | 冰冻切片神经纤维免疫荧光染色(PGP9.5)试剂盒 |
组织PKCβ1激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 内皮分化相关因子1抗体 |
含patatin样磷脂酶6 | 蛋白酶抑制剂14抗体 |
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS)不含NaHCO3 | 血液一氧化氮合成酶总活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
快速盐析法DNA萃取试剂盒 | 细胞组蛋白乙酰转移酶(HAT)总活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
组织相容性复合体2DOA | 血管生成素相关蛋白6抗体 |
胶质细胞谷氨酸运载蛋白3/神经/上皮细胞谷氨酸运载蛋白 | A型流感病毒H5N1神经氨酸酶1抗体 |
PE标记人CD11b单克隆 | 粒细胞趋化蛋白2/GCP2抗体 |
AF750标记的核因子κB抑制蛋白E | Recombinant Human PKM2艾滋病病毒p24抗体 |
饮料变质细菌(脂环酸芽孢杆菌属Alicyclobacillus)鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 | IQCF1蛋白抗体 |
关键字: PKM2;21.9 kDa ; 35-221;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。