重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白属于Mg²⁺/Mn²⁺依赖性的PP2C家族丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶。PPM1F在细胞信号转导中扮演关键调控角色,它不仅是钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaMK)的特异性磷酸酶,还被证实是整合素β1亚基T788/T789位点的生理性磷酸酶。通过去磷酸化这些关键底物,PPM1F能够负向调控整合素的活性,进而影响细胞与细胞外基质的粘附和细胞迁移。研究表明,PPM1F在胚胎发育中至关重要,同时其表达水平与多种肿瘤细胞的侵袭能力密切相关,既能通过抑制整合素活性降低细胞粘附,又能通过调控PAK激酶促进细胞运动,从而促
产品名称; Recombinant Human PPM1F
别名; Ca(2+)/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase, CaM-kinase phosphatase, CAMKP, CaMKPase, FEM 2, hFEM-2, KIAA0015, Partner of PIX 2, POPX2, PP2C phosphatase, Ppm1f, PPM1F_HUMAN, Protein fem-2 homolog, Protein phosphatase 1F, Protein phosphatase 1F (PP2C domain containing), Protein phosphatase Mg2+/Mn2+ dependent 1F
宿主; E.Coli
表达区间; 1-454
分子量; 49.8 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
突变的黑色素瘤相关抗原1 | 总脂肪酶(lipase)定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化白介素1受体1 | PROTEASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒 |
寡核苷酸探针非同位素AP化学发光法RNA北方杂交完全试剂盒 | 体外微管蛋白聚合作用(polymerization)荧光酶联免疫试剂盒 |
组织肾素(renin)荧光共振能量转移法(FRET)定量pcr检测试剂盒 | 血液甘肽S转移酶(GSH ST)总活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞色素P450亚酶CYP2B(EFC)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 癌调蛋白/癌钙蛋白抗体 |
睾丸特异性Y蛋白样5 | kelch样蛋白13抗体 |
MAPK蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 体液基质金属抑制剂2(TIMP-2)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
咖啡甘素(dulcin)含量薄层色谱法定性pcr检测试剂盒 | 石蜡切片组织衰老特异性晚期脂褐素铁还原法 |
轴丝动力蛋白11 | FAM134B蛋白抗体 |
甲状腺激素受体相互作用15 | 膜相关环指蛋白4抗体 |
PE标记人CD11c单克隆 | 蛋氨酸氨肽酶1D抗体 |
细菌醛酮还原酶(aldo-keto reductase)总活性比色法定量检测试剂 | Recombinant Human PPM1F嗅觉受体52H1抗体 |
14号染色体开放阅读框106抗体 | 22号染色体开放阅读框26抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: PPM1F;49.8 kDa ; 1-454;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。