重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
PRKAB1(AMP激活蛋白激酶亚基β-1)是AMPK异三聚体复合物的关键支架亚基,负责连接催化性的α亚基和调节性的γ亚基,从而调控AMPK的组装与活性。作为细胞能量状态的核心传感器,AMPK通过直接磷酸化多种代谢酶和转录调节因子,抑制蛋白质、脂肪酸和碳水化合物的合成,从而在能量缺乏时维持细胞的能量平衡。此外,PRKAB1还参与调控细胞极性,可能通过间接激活肌球蛋白来重塑肌动蛋白细胞骨架。
产品名 | Recombinant Human PRKAB1 | 分子量 | 44.1 KDa |
表达区间 | 62-269 | 货号 | XG-DB3076 |
别名
AMPK, AMPK beta 1, AMPK subunit beta 1, AMPKb, HAMPKb, PRKAB1
宿主; E.Coli
表达区间; 62-269
分子量; 44.1 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
脱磷酸辅酶A结构域蛋白 | 体液前列E2(PGE2)高效液相色谱法荧光定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化p38MAPK | 物理法石蜡切片松动组织抗原修复处理试剂盒 |
植物组织可溶性膜蛋白粗提制备试剂盒 | 冰冻切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织Akt1/PKBa激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 冰冻切片网硬蛋白(RETICULIN)染色试剂盒 |
水中肠杆菌(E. coli)比色法定量pcr检测试剂盒 | β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体 |
睾丸酸性磷酸酶 | KIAA0427蛋白抗体 |
PI-3 KINASE P110BETA蛋白表达ELISA定量pcr检测试剂盒 | 体液基质金属(MMP-12)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
酒类精(arginine)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 通用型线粒体DNA片段常见缺失(CD4977)定性分析试剂盒 |
转录因子相关蛋白NK2 | FITC标记人CD23单克隆抗体 |
角蛋白相关蛋白11-1 | 内质网凝集素1抗体 |
PLEKHA7蛋白 | 电压依赖性钙通道Cav3.1抗体 |
酵母菌SD-LEU/TRP/HIS培养基 | Recombinant Human PRKAB1原肌球蛋白调节蛋白4抗体 |
内皮细胞分化鞘脂G蛋白偶联受体1重组兔单克隆抗体 | 5-三磷酸肌醇受体1抗体 |
关键字: PRKAB1;44.1 KDa; 62-269;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。