重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白是一种神经元特异性的 II 型跨膜蛋白,在中枢神经系统中高表达,尤其在突触前末梢富集。其核心功能是作为“神经稳定性蛋白”,通过双重机制调控神经元兴奋性:一方面,它作为电压门控钠通道 Nav1.2 和 Nav1.6 的负调控因子,抑制其膜定位和通道活性;另一方面,它通过与 SNARE 复合物相互作用,调节钙离子依赖的突触囊泡融合与神经递质释放。此外,PRRT2 还参与调控肌动蛋白细胞骨架动态,影响突触形成与树突棘发育。该基因的突变与多种发作性神经系统疾病密切相关,包括发作性运动诱发性运动障碍(PKD)
产品名 | Recombinant Human PRRT2 | 分子量 | 29.4 kDa |
表达区间 | 1-268 | 货号 | XG-DB3105 |
别名
interferon induced transmembrane protein domain containing 1, BFIC2, BFIS2, Dispanin subfamily B member 3, DSPB3, Dystonia 10, DYT10, EKD1, FICCA, FLJ25513, ICCA, IFITMD1, Infantile convulsions and paroxysmal choreoathetosis, PKC, Proline rich transmembrane protein 2, Proline-rich transmembrane protein 2, PRRT2, PRRT2_HUMAN
宿主; E.Coli
表达区间; 1-268
分子量; 29.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
同源转录因子DLX1 | 氯(Cl)定量酶联免疫试剂盒 |
FbxL6蛋白 | 载玻片细胞COLLAGEN III蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
低内毒素小量质粒抽提试剂盒 | IL蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
小量腺病毒沉淀法纯化试剂盒 | 通用型维生素B1比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细菌多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 卵磷酯胆固醇酰基转移酶抗体 |
共济失调蛋白7样2 | 端粒调控因子2抗体 |
动物细胞周期M期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 | 细胞磷脂皮尔斯(Pearse)染色试剂盒 |
活体内蛋白质交联免疫共沉淀pcr检测试剂盒 | 血液磷酸二酯酶(PDE)总活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
转录因子同源蛋白NKX2.4 | 液泡蛋白分选蛋白25抗体 |
肌萎缩侧索硬化症相关蛋白FGGY | 22号染色体开放阅读框36抗体 |
Rad51样蛋白1 | 磷酸化β-肌动蛋白抗体 |
SARS冠状病毒2 N蛋白小鼠单克隆 | Recombinant Human PRRT2癌胚抗原相关细胞粘附分子8抗体 |
体液亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 | HERC6 E3泛素蛋白连接酶抗体 |
关键字: PRSS3;41 kDa; 2-375;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。