重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白是一种定位于线粒体的同型多聚体酶,作为脯氨酸生物合成途径的限速酶,它催化吡咯啉-5-羧酸(P5C)不可逆地还原为脯氨酸,并在此过程中调节 NAD(P)H/NAD(P)+ 的氧化还原平衡。作为细胞代谢重编程的关键因子,PYCR1 在多种生理和病理过程中发挥核心作用:一方面参与胶原蛋白合成与结缔组织形成,其基因突变可导致皮肤松弛症(ARCL2B);另一方面,它在肝癌、肺癌、膀胱癌等多种肿瘤中异常高表达,通过促进肿瘤细胞增殖、抑制凋亡及重塑肿瘤微环境来驱动癌症进展,因此被视为一个有潜力的肿瘤标志物和治疗靶
产品名称; Recombinant Human PYCR1
别名; P5C, P5C reductase, P5C reductase 1, P5CR, P5CR 1, PIG45, PP222, Proliferation inducing protein 45, PYCR, PYCR 1, Pyrroline 5 carboxylate reductase 1, Pyrroline 5 carboxylate reductase 1 mitochondrial
宿主; E.Coli
表达区间; 168-319
分子量; 36.2 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触囊泡融合蛋白Unc18-3 | 脂肪氧化酶(lipoxygenase)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
亮氨酸拉链蛋白4 | 盐酸化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒 |
植物组织可溶性膜蛋白高纯制备试剂盒 | 冰冻切片组织PAR-2蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法 | 细胞氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
水中贾第鞭毛虫(Giardia)基因荧光定量pcr检测试剂盒 | β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(X11α) |
骨形态发生蛋白2 | KIAA0494蛋白抗体 |
HISTONE H3蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 细胞基质金属(MMP-13)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
化妆品阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性pcr检测试剂盒 | 伊文思蓝(EVANS BLUE)植物细胞繁殖测定试剂盒 |
磷酸化转录因子SOX9蛋白 | FBXL20蛋白抗体 |
基质细胞衍生因子4(钙结合蛋白) | 尼曼匹克C2前体蛋白抗体 |
PE标记人CD16单克隆 | 二肽基肽酶10抗体 |
电击法酵母细胞转化试剂盒 | Recombinant Human PYCR1异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体 |
AF750标记的磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 | ATP-依赖的RNA解旋酶p47抗体 |
关键字: PYCR1;36.2 kDa; 168-319;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。