重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白属于RGS蛋白家族,其结构包含一个RGS结构域、两个Ras结合结构域(RBDs)和一个GoLoco结构域。作为G蛋白信号通路的关键调节因子,RGS14通过充当GTP酶激活蛋白(GAP)和GDP解离抑制因子(GDI),精确调控G蛋白α亚基(如GNAI1/GNAI3)的活性,从而终止G蛋白偶联受体(GPCR)信号。此外,它还能作为支架蛋白整合G蛋白与Ras/Raf/MAPK信号通路,参与调控细胞增殖、神经突生长及记忆处理等过程。
产品名 | Recombinant Human RGS14 | 分子量 | 49.3 kDa |
表达区间 | 301-566 | 货号 | XG-DB3238 |
别名
Highly similar to rap1/rap2 interacting protein, OTTHUMP00000223586, OTTHUMP00000223587, Regulation of G protein signaling 14, Regulator of G protein signaling 14, Regulator of G protein signalling 14, Regulator of G-protein signaling 14, RGS 14, RGS14, RGS14_HUMAN
宿主; E.Coli
表达区间; 301-566
分子量; 49.3 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MAK | 石蜡切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接酶联免疫试剂盒(含HRP一抗) |
EI2BL/MRI1蛋白 | 载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞色素P450亚酶CYP1A1(EROD)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 细胞MYC蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
肠毒素G(Staphylococcus aureus : enterotoxin G)鉴定16S rDNA PCR扩增pcr检测试剂盒 | 细胞O链接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细菌(PROTEASE)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 吗啡单克隆抗体 |
钙粘附分子18 | 蛋白激酶A2抗体 |
细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | (Verhoeff-Van Gieson)染色试剂盒 |
法医学基因组DNA萃取试剂专题 | 体液硝酸盐含量荧光定量pcr检测试剂盒 |
轴丝动力蛋白重链9 | 叶酸受体α/α-FR 抗体 |
肌细胞特异性增强因子2D | 22号染色体开放阅读框25抗体 |
PE-Cy7标记小鼠NK1.1单克隆 | 磷酸化胞吞再循环相关衔接蛋白CENTB1抗体 |
AbBy Fluor® 5647标记的脑质膜单胺转运蛋白PMAT | Recombinant Human RGS14T细胞调控相关蛋白抗体 |
植物辅酶Q含量比色法定量检测试剂盒 | KLHDC1蛋白抗体 |
关键字: RGS14;49.3 kDa ; 301-566;
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