重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
人 RHOA 重组蛋白是在实验室中(通常在大肠杆菌中)通过基因工程技术表达并纯化的一种蛋白质,常用 His 或 Flag 标签进行标记。RHOA(Ras同源家族成员A)属于 Rho 小 GTP 酶家族,在细胞内作为关键的“分子开关”发挥作用,通过在 GTP 结合的“激活”状态和 GDP 结合的“静息”状态之间循环,精细调控肌动蛋白细胞骨架的重组、细胞形态、迁移及增殖等多种细胞活动。研究表明,RHOA 在多种癌症中存在基因突变或异常表达,与肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,同时也是心血管疾病(如高血压)和自身
产品名 | Recombinant Human RHOA | 分子量 | 35 KDa |
表达区间 | 61-193 | 货号 | XG-DB3246 |
别名
Aplysia ras related homolog 12, ARH12, ARHA, H 12, H12, Oncogene RHO H12, Ras homolog family member A, Ras homolog gene family member A, Rho A, Rho cDNA clone 12, RHO H12, RHO12, RHOA, RHOA_HUMAN, RHOH12, Small GTP binding protein Rho A, Transforming protein Rho A, Transforming protein RhoA
宿主; E.Coli
表达区间; 61-193
分子量; 35 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
微丝相关蛋白4 | 肠毒素G(Staphylococcus aureus : enterotoxin G)鉴定16S rDNA PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
类固醇5α还原酶1(5α-Reductase 1) | DNA南方杂交印迹消除试剂盒 |
空调清洁剂 | 石蜡切片组织CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞WEE1激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 细胞脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量酶联免疫试剂盒 |
海鲜氟元素比色法定量pcr检测试剂盒 | SMYD1蛋白抗体 |
钙粘样蛋白28 | G蛋白转录因子α3抗体 |
NF KAPPA B P65蛋白表达ELISA定量pcr检测试剂盒 | 细胞AURORA-A激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
多聚赖载玻片 | 动物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 |
自噬相关蛋白8A | FITC标记人HLA-DR单克隆抗体 |
甲硫氨酸转运RNA合成酶 | 磷酸酶和张力蛋白同系物抗体 |
PE-Cy7标记小鼠Ly-6G/Ly-6C单克隆 | 成纤维细胞生长因子17抗体 |
动物细胞醛酮还原酶1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Human RHOA运动神经元及胰腺同源蛋白1抗体 |
SARS冠状病毒2 Spike S1抗体 | APC标记人CD163单克隆抗体 |
关键字: RHOA;35 KDa ; 61-193;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。