重组蛋白是如何“诞生”的?
重组蛋白的生产过程就像是一场精密的分子手术,主要分为以下几个步骤:
基因克隆:科学家先找到并复制出决定该蛋白质结构的“基因蓝图”(目的基因)。
构建载体:将这段“基因蓝图”插入到一个被称为“载体”(通常是质粒或病毒)的运输工具中。
转入宿主:把这个携带了新指令的载体送入“工厂”(宿主细胞,如大肠杆菌、CHO细胞等)。
表达与纯化:宿主细胞根据新指令大量生产蛋白质,最后科学家通过复杂的工艺将这些蛋白质分离、纯化出来。
产品概述:
该蛋白通常为带有N端His标签的融合蛋白,对应于人源ROX(Ribosomal oxygenase,也称为MINA或MDIG)蛋白的1-465氨基酸区域,分子量约为51 kDa。其纯度经SDS-PAGE分析大于95%,性状为从含有海藻糖(Trehalose)的缓冲液中冻干所得。ROX是一种核仁蛋白,具有组蛋白赖氨酸去甲基化酶和组氨酸羟化酶的双重活性,参与核糖体生物发生及表观遗传调控,其表达受Myc原癌基因诱导,并与细胞增殖、矿尘诱导的肺部疾病等相关。
产品名称; Recombinant Human ROX
别名; 60S ribosomal protein L27a histidine hydroxylase, Bifunctional lysine specific demethylase and histidyl hydroxylase MINA, FLJ14393, Histone lysine demethylase MINA, MDIG, MINA, MINA_HUMAN, Mineral dust-induced gene protein, MYC induced nuclear antigen, Myc induced nuclear antigen 53 kDa, MYC-induced nuclear antigen, NO52, Nucleolar protein 52, Ribosomal oxygenase MINA, ROX
宿主; E.Coli
表达区间; 1-465
分子量; 51 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
核心应用:
重组蛋白技术是现代生物技术、医学研究和制药工业的基石,应用极为广泛。
生物制药
这是重组蛋白最核心和价值最高的应用领域。许多过去只能从人或动物体内提取、来源稀少且昂贵的药物,现在都可以通过重组技术大规模生产。例如:
细胞因子:如促红素(治疗贫血)、干扰素(抗病毒、抗肿瘤)、白细胞介素等。
激素:如重组人胰岛素(治疗糖尿病)、人生长激素。
凝血因子:用于治疗血友病。
单克隆抗体:已成为肿瘤、自身免疫性疾病等领域最重要的治疗药物之一。
疫苗开发
重组蛋白疫苗是一种重要的疫苗类型。它通过基因工程在体外细胞中表达病毒的关键抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),纯化后制成疫苗。这类疫苗不含活病毒,安全性高,且抗原成分精确、纯度高。
科研与诊断
重组蛋白是生命科学研究中不可或缺的工具。
细胞培养:作为生长因子、细胞因子等添加剂,用于干细胞诱导、细胞分化等研究。
免疫学研究:作为抗原用于开发ELISA等免疫检测试剂盒,或用于产生抗体。
结构与功能研究:帮助科学家研究蛋白质的结构、功能以及细胞信号通路。
公司正在出售的产品:
碳水化合物激酶结构域蛋白质 | 活体细胞组织K(CATHEPSIN K)活性原位荧光染色酶联免疫试剂盒 |
ENPP4蛋白 | 细胞CASPASE-1蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
细胞色素P450亚酶2C8(PACLILAXEL)活性高效液相色谱法(HPLC)定量pcr检测试剂盒 | 冰冻切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒标准曲线定量PCR扩增pcr检测试剂盒 | 通用型精(arginine)含量化学比色法定量酶联免疫试剂盒 |
体液基质金属(MMP-8)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 卵透明带糖蛋白2抗体 |
肝癌新基因3蛋白 | 蛋白精氨酸甲基转移酶2抗体 |
纯化线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 | 全组织琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒 |
动物糖解法非N非O糖基磷脂酰肌醇(GPI) | 组蛋白脱乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
周期素样Y1 | 氧固醇结合蛋白1抗体 |
肌微管素相关蛋白9 | AF488标记人CD105单克隆抗体 |
PE标记人CD105单克隆 | 利钠肽受体A抗体 |
13号染色体开放阅读框12 | Recombinant Human ROX白细胞共同抗原抗体 |
细胞中链脂酰氧化酶(acyl-CoA oxidase) | KLHDC9蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: ROX;51 kDa ; 1-465;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。