重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白对应于人源RPE65(Retinal Pigment Epithelium-specific protein 65kDa)的全长氨基酸序列,属于视黄醇脱氢酶/异构酶家族。其核心功能是在视网膜的视觉循环(Visual Cycle)中,作为异构酶催化全反式视黄酯(all-trans-retinyl ester)转化为11-顺视黄醛(11-cis-retinal),这是视觉色素再生的关键限速步骤。这一过程为视杆和视锥细胞提供感光色素的生色团,从而维持暗视觉和明视觉。RPE65的功能缺失突变是导致莱伯先天性
产品名 | Recombinant Human RPE | 分子量 | 25 kDa |
表达区间 | 1-228 | 货号 | XG-DB3271 |
别名
2810429B02Rik, 5730518J08Rik, EC 5.1.3.1, MGC124653, MGC2636, OTTHUMP00000163939, Ribulose 5 phosphate 3 epimerase, Ribulose 5 phosphate epimerase, Ribulose phosphate 3 epimerase, Ribulose-5-phosphate-3-epimerase, Ribulose-phosphate 3-epimerase, rpe, RPE_HUMAN, RPE2 1
宿主; E.Coli
表达区间; 1-228
分子量; 25 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
透明质酸结合蛋白2 50kDa重链 | AP标记抗体稳定/稀释溶液 |
EXD2蛋白 | 冰冻切片组织PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
贾第鞭毛虫(Giardia)涂片免疫荧光染色试剂盒 | 细胞HISTONE H3蛋白表达荧光定量酶联免疫试剂盒 |
线虫β-半乳糖苷酶化学发光定量pcr检测试剂盒 | 植物精(arginine)含量高效液相色谱法定量酶联免疫试剂盒 |
体液基质金属(MMP-10)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 脑胰蛋白酶3抗体 |
肝再生磷酸酯酶2 | 蛋白磷酸酶3调节亚基R2抗体 |
HOECHST33342/PI简易细胞核形态染色试剂盒 | 冰冻切片神经胶质染色试剂盒 |
动物糖蛋白刀豆蛋白A(ConA)树脂法纯化试剂盒 | 血液异戊二烯焦磷酸异构酶(isopentenyl pyrophosphate isomerase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
滋养层细胞糖蛋白5T4 | 有机阴离子转运体4抗体 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白7 | APC-Cy7标记小鼠CD4单克隆抗体 |
PE标记人CD35单克隆 | 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体 |
AF680标记的细胞表面趋化因子受体7 | Recombinant Human RPEZCCHC8蛋白抗体 |
HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 | G蛋白信号转导调节因子13抗体 |
关键字: RPE;25 kDa ; 1-228;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。