重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白包含一个保守的 RWD 结构域(位于 N 端),该结构域通常参与蛋白质-蛋白质相互作用,常见于泛素化系统和转录调控相关的蛋白中。目前,RWDD4A 的具体生物学功能尚在研究中,尚未被完全阐明,初步研究推测其可能参与细胞内的信号转导或蛋白质修饰过程。重组人源 RWDD4A 蛋白(通常为带有 N 端 His 标签的全长蛋白,氨基酸范围 1-188)主要用于作为生物化学对照、质谱分析(Mass Spec)以及蛋白质相互作用研究的工具,以进一步探索其在细胞生理和病理过程中的潜在作用。
产品名称; Recombinant Human RWDD4A
别名; FAM28A, Family with sequence similarity 28, member A, RWD domain containing 4, RWD domain containing 4A, RWD domain containing protein 4A, RWD domain-containing protein 4, RWDD4, RWDD4_HUMAN, RWDD4A
宿主; E.Coli
表达区间; 1-188
分子量; 20.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
同源转录因子DLX6 | 低盐LB细菌培养液 |
离子通道蛋白Kv1.3 | 活体细胞半胱13(CASPASE-13)活性原位荧光染色酶联免疫试剂盒 |
金属元素定量检测试剂专题 | 体内微管蛋白聚合作用(polymerization)酶联免疫试剂盒 |
组蛋白脱乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 植物还原型甘肽(GSH)浓度比色法定量酶联免疫试剂盒 |
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2D6(DEXTROMETHORPHAN) 活性高效液相色谱法(HPLC)定量pcr检测试剂盒 | ZSWIM7蛋白抗体 |
甘油二酯激酶α/DGK-α | KIAA1429蛋白抗体 |
细胞RHO 蛋白表达流式细胞仪pcr检测试剂盒 | 体液基质金属(MMP-8)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
等电聚焦蛋白电泳(IEF)10倍染色溶液 | 细胞衰老特异性早期脂褐素油性红原位染色试剂盒 |
棕榈酰蛋白硫酯酶1 | FITC标记人TDT单克隆抗体 |
鸡新城疫血凝素 | 绿色荧光蛋白TurboGFP单克隆抗体 |
Ras-GTP酶激活蛋白3 | 短链脱氢还原酶12抗体 |
乳酸菌噬菌体溶斑pcr检测试剂盒 | Recombinant Human RWDD4A异型组蛋白H2A.2抗体 |
热休克蛋白家族40单克隆抗体 | AF488标记人CD11c单克隆抗体 |
关键字: RWDD4A;20.6 kDa ; 1-188;
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