重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
人 SIAH1 重组蛋白是在实验室中(通常在大肠杆菌或哺乳动物细胞表达系统中)通过基因工程技术表达并纯化的一种蛋白质,常带有 His 或 Fc 等标签。SIAH1(Seven in absentia homolog 1)是一种高度保守的 E3 泛素连接酶,在细胞内负责识别特定底物蛋白并介导其通过泛素-蛋白酶体途径降解。
产品名称; Recombinant Human SIAH1
别名; E3 ubiquitin-protein ligase SIAH1, FLJ08065, hSIAH1, HUMSIAH, Seven in absentia homolog 1, Seven in absentia homolog 1 (Drosophila), Siah 1, Siah 1a, Siah E3 ubiquitin protein ligase 1, Siah-1, Siah-1a, Siah1, SIAH1_HUMAN, SIAH1A, Ubiquitin ligase SIAH1
宿主; E.Coli
表达区间; 90-282
分子量; 21.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
通用转录因子ⅡA亚基2 | 水样品内毒素凝胶法定量酶联免疫试剂盒 |
老年性痴呆蛋白APH2 | TEM电镜免疫细胞化学HRP酶联DAB基础酶联免疫试剂盒(无一抗和二抗) |
蛋白样品多粘菌素层析法去内毒素试剂盒 | 冰冻切片组织MYC蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞MAPKAP KINASE3激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 细胞特恩布尔(TURNBULL-DAB)非血红素铁(二价)强化染色试剂盒 |
麦芽粉β-活性PNPG5酶偶联比色法定量pcr检测试剂盒 | 艾滋病病毒EP1抗体 |
钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白2 | ILK结合蛋白LIMS2抗体 |
CASPASE-10蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 组织BLK激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
蛋白表位标记技术试剂盒 | 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 |
肿瘤抑制转移候选基因3 | FAM122B蛋白抗体 |
结合珠蛋白/触珠蛋白 | 钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体 |
PE标记人CD52单克隆 | 蛋白磷酸酶1调节亚基7抗体 |
裂解液IX:真菌/酵母细胞裂解液 | Recombinant Human SIAH1早期发育调控蛋白2/HDC2抗体 |
神经激肽1抗体 | ABC膜转运蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: SIAH1;21.1 kDa; 90-282;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。