重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白属于 Sirtuin 家族(去乙酰化酶家族),是一种 NAD⁺ 依赖性的线粒体蛋白。与同家族的 SIRT1 不同,SIRT4 的主要酶活性并非去乙酰化,而是ADP-核糖基转移酶、脂酰胺酶和去酰基酶活性。其核心功能是作为代谢调控因子,通过抑制谷氨酸脱氢酶(GDH)和丙酮酸脱氢酶(PDH)的活性,严格调控谷氨酰胺代谢、脂质代谢及胰岛素分泌。SIRT4 在维持线粒体稳态、抗氧化应激及基因组稳定性中发挥重要作用,且被证实具有肿瘤抑制因子的功能(如在胰腺癌、胃癌中)。重组人源 SIRT4(通常为 N 端带 H
产品名 | Recombinant Human SIRT4 | 分子量 | 52.7 kDa |
表达区间 | 1-314 | 货号 | XG-DB3419 |
别名
MGC130046, MGC130047, MGC57437, NAD dependent deacetylase sirtuin 4, NAD dependent protein deacetylase sirtuin 4, NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4, NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-4, NAD-dependent protein lipoamidase sirtuin-4, mitochondrial, Regulatory protein SIR2 homolog 4, Silent mating type information regulation 2 homolog, Sir 2 like 4, SIR 2 like protein 4
宿主; E.Coli
表达区间; 1-314
分子量; 52.7 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
味觉受体蛋白家族2亚基16 | TEM电镜免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP完全间接酶联免疫试剂盒 |
EDEM1蛋白 | 载玻片细胞BCL2蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
口糖木糖醇比色法定量pcr检测试剂盒 | 载玻片细胞CREB蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
细菌抗生素(甲氧苯青)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)pcr检测试剂盒 | 植物总RNA纯化试剂盒(低多糖/酚) |
细胞BLK激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 锚蛋白重复域54抗体 |
肝特异性有机阴离子转运蛋白LST1 | 蛋白酪氨酸磷酸酶受体F多肽α3抗体 |
伊文思蓝(EVANS BLUE)植物细胞繁殖测定试剂盒 | 冰冻切片特恩布尔(TURNBULL-DAB)非血红素铁(二价)强化染色试剂盒 |
大量蛋白样品液相法去内毒素试剂盒 | 纯化溶酶体酸性磷酸酶活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
猪瘟病毒E2 | 原癌基因H-ras抗体 |
基质金属蛋白酶-24 | Bcl2样凋亡蛋白14抗体 |
PE-Cy7标记人CD23单克隆 | 赖氨酸tRNA的连接酶抗体 |
细胞分裂周期蛋白23重组兔单克隆 | Recombinant Human SIRT4X染色体开放阅读框67抗体 |
细胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增检测试剂盒 | HORMAD1蛋白抗体 |
关键字: SIRT4;52.7 kDa; 1-314;
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