重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白通常为带有N端His标签的融合蛋白,对应于人源SNAP25(序列型P60880-1)的Met1-Gly206氨基酸区域,分子量约为24.8 kDa(计算值),在SDS-PAGE中迁移率约为28 kDa。SNAP25是SNARE蛋白家族的核心成员,作为t-SNARE蛋白,它与Syntaxin-1和Synaptobrevin共同组装成SNARE复合物,形成四螺旋束结构,介导突触囊泡与细胞膜的锚定与融合,是调控神经递质释放的关键分子。除了在突触传递中的经典作用,研究还发现其参与调控电压门控钙通道、膜蛋白运
产品名称; Recombinant Human SNAP25
别名; bA416N4.2, Bdr, CMS18, dJ1068F16.2, FLJ23079, HGNC:11132, MGC105414, MGC139754, Resistance to inhibitors of cholinesterase 4 homolog, RIC 4, RIC-4, RIC4, SEC 9, SEC9, SNAP, SNAP 25, SNAP-25, SNAP-25B, SNAP25, SNP 25, SNP25, SNP25_HUMAN, sp, SUP, Super protein, Synaptosomal associated 25 kDa protein, Synaptosomal associated protein, Synaptosomal associated protein 25
宿主; E.Coli
表达区间; 1-206
分子量; 44.0 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
特异性囊肿病液体蛋白15 | 血液尿酸含量酶偶联比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FAM96A蛋白 | 冰冻切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织汞元素比色法定量pcr检测试剂盒 | ERK蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
酵母菌完全补充混合(CSM)培养基 | 咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量酶联免疫试剂盒 |
体液基质金属(MMP-9)明胶法比色定量pcr检测试剂盒 | 膜相关环指蛋白2抗体 |
谷氨酸半胱氨酸γ合成酶 | 凋亡相关蛋白4抗体 |
高多糖/酚植物线粒体DNA萃取试剂盒 | 细胞黑色素(MELANIN)染色试剂盒 |
超敏型ECL免疫印迹化学发光溶液 | 细胞磷酸二酯酶5(PDE5)活性酶连续循环定磷比色法定量pcr检测试剂盒 |
转铁蛋白 | 乙醇脱氢酶6抗体 |
脊髓灰质炎病毒受体相关结构域蛋白 | APC标记人HLA-DR单克隆抗体 |
PTB结合核蛋白2 | 磷酸化NF-κB活化激酶抗体 |
AF750标记的细胞角蛋白18单克隆 | Recombinant Human SNAP25γ氨基丁酸运载蛋白3抗体 |
细胞5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性 | HRAS1抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: SNAP25;44.0 kDa; 1-206;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。