重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白由SPOP基因编码,属于BTB/POZ蛋白家族,是Cullin3-RING泛素连接酶(CRL3)复合体的底物识别亚基。其核心功能是作为E3泛素连接酶的接头蛋白,通过N端的MATH结构域识别并结合特定底物蛋白(如PDX1、DAXX、GLI2/3等),并通过C端的BTB结构域招募Cullin3,介导底物蛋白的多聚泛素化修饰,从而靶向蛋白酶体降解。SPOP在细胞核内的斑点状结构(Nuclear Speckles)中富集,参与调控基因转录、DNA损伤修复、细胞周期及Wnt/β-catenin等信号通路。该蛋
产品名称; Recombinant Human SPOP
别名; BTBD32, HIB homolog 1, Roadkill homolog 1, Speckle type POZ protein, Speckle-type POZ protein, SPOP, SPOP_HUMAN, TEF 2, TEF2
宿主; E.Coli
表达区间; 1-374
分子量; 41 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
微管相关蛋白9 | 一氧化氮合成酶(NOS)总活性终点比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FITC标记人CD23单克隆 | 血清钙比色法定量酶联免疫试剂盒 |
pPICZ+目的基因 | 细胞线粒体复合物I蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
植物细胞叶绿体DNA萃取试剂盒 | 通用型烟草环斑病毒(Tobacco Ringspot Virus;TRSV) |
血液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白2抗体 |
骨形态发生蛋白8 | 多功能DNA修复酶抗体 |
胚胎干细胞造血细胞(hematopoitic)定向分化试剂盒 | 胞浆甘肽S转移酶(GSH ST)活性酶动力比色法定量pcr检测试剂盒 |
北方杂交印迹消除试剂盒 | 细胞三磷酸肌醇(IP3)含量FR定量pcr检测试剂盒 |
组蛋白赖氨酸N-甲基SETMAR | 选择性剪接因子3B亚基4抗体 |
环指蛋白67 | AF700标记人CD33单克隆抗体 |
Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1 | 磷酸化蛋白激酶C mu型抗体 |
辣根过氧化物酶标记的白细胞介素13受体a2 | Recombinant Human SPOP氨基末端激酶1/2抗体 |
细胞超长链脂酰脱氢酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒 | LIN7C蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: SPOP;41 kDa; 1-374;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。