重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白是通用转录因子TFIIE的较大亚基(约57 kDa),与小亚基TFIIEβ(34 kDa)形成异二聚体。其核心功能是作为转录调控的“枢纽”,通过其酸性羧基末端和保守的锌指结构域,介导TFIIE与TFIIH复合物的特异性相互作用,从而招募并调节TFIIH的激酶和解旋酶活性。TFIIEα直接结合在启动子DNA的转录起始位点(+1)附近的-10区域,该区域是DNA解链形成“转录泡”的关键位置,表明其在启动子逃逸和稳定开放复合物中发挥核心作用。重组人TFIIEα是体外重建转录系统、研究转录起始机制及筛选转录
产品名称; Recombinant Human TFIIE alpha
别名; FE, General transcription factor IIE 56 kDa subunit, General transcription factor IIE subunit 1, General transcription factor IIE, polypeptide 1, alpha 56kDa, Gtf2e1, MAL7P1.86, T2EA_HUMAN, TF2E1, TFIIE A, TFIIE alpha, TFIIE-alpha, Transcription initiation factor IIE alpha subunit, Transcription initiation factor iie alpha subunit putative, Transcription initiation factor IIE subunit alpha
宿主; E.Coli
表达区间; 1-439
分子量; 48.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl | 通用型HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
跨膜蛋白18 | 海洋动物种系18sRNA基因扩增分析试剂盒 |
赫特法病毒DNA纯化试剂盒 | 冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织ABL1激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 冰冻切片中性脂质苏丹黑染色试剂盒 |
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP3A(END)活性 | 癌相关核蛋白抗体 |
睾丸特异丝氨酸/苏氨酸激酶6 | Kelch样蛋白15抗体 |
石蜡切片组织TSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞葡萄糖6-磷酸酶(glucose 6-phosphatase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
PCR探针TAG聚合酶标记试剂盒 | 载玻片细胞有丝分裂NBT显色pcr检测试剂盒 |
转录因子SOX7 | EML1蛋白抗体 |
结肠癌抗原3 | 慢性淋巴细胞白血病缺失基因6蛋白抗体 |
PRDM锌指转录因子PRDM4 | 单羧酸转运蛋白-1抗体 |
病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human TFIIE alpha胰岛素样生长因子-II抗体 |
12号染色体开放阅读框49抗体 | ATP依赖RNA解旋酶DDX50抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: TFIIE alpha;48.2 kDa; 1-439;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。