重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
该蛋白是一种跨膜糖蛋白,作为凝血因子VII/VIIa(FVII/FVIIa)的高亲和力受体,在血管损伤时暴露于血液中,通过形成TF-FVIIa复合物启动外源性凝血级联反应,进而激活因子IX和X,最终导致凝血酶爆发式生成和纤维蛋白血栓形成。除了经典的止血功能,TF还通过蛋白酶激活受体(PARs)介导细胞信号传导,参与炎症、血管生成、肿瘤进展及转移等病理过程。重组人组织因子是制备凝血酶原时间(PT)检测试剂的核心原料,也是研究血栓性疾病、脓毒症及恶性肿瘤高凝状态的关键工具蛋白。
产品名 | Recombinant Human Tissue factor | 分子量 | 24.2 kDa |
表达区间 | 31-251 | 货号 | XG-DB3627 |
别名
CD142, CD142 antigen, Coagulation factor III, Coagulation factor III (thromboplastin tissue factor), F3, FLJ17960, TF, TF_HUMAN, TFA, Thromboplastin, Tissue factor
宿主; E.Coli
表达区间; 31-251
分子量; 24.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
维甲酸受体G | 简单细菌结晶紫染色试剂盒 |
磷酸二酯酶4B | 组织样品阴性染色试剂盒 |
核酸蛋白结合凝胶迁移电泳分析(EMSA)试剂盒 | P38蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
组织钙调蛋白(CaM)活性酶连续循环比色法定量pcr检测试剂盒 | 体液D-乳酸比色法定量酶联免疫试剂盒 |
糖类D-半乳糖含量光谱法定量pcr检测试剂盒 | α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体 |
甘油-3-磷酸酰基转移酶4 | L型电压依赖型钙通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗体 |
冰冻切片组织PAR-1蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 组织PKCβ2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
L-谷氨酰-α-萘酰胺 | 活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位染色试剂盒(超氧阴离子) |
转录激活蛋白CRSP8 | FAM59B蛋白抗体 |
急性髓细胞白血病1蛋白1/2 | 磷酸化自噬相关蛋白1抗体 |
PerCP-Cy5.5标记人CD117 (c-kit)单克隆 | 短链脱氢酶/还原酶家族4样1蛋白抗体 |
细胞CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human Tissue factor血红蛋白α/Hemoglobin A1c抗体 |
细胞信号转导分子Smad-1重组兔单克隆抗体 | 2型神经纤维瘤抗体 |
关键字: Tissue factor;24.2 kDa; 31-251;
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