重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
TNNI1是肌钙蛋白复合物的三个亚基之一,作为抑制性亚基(Inhibitory subunit),它在调节骨骼肌收缩中发挥核心作用。该蛋白特异性地在慢肌骨骼肌纤维(慢抽动纤维)中表达,通过阻断肌动蛋白与肌球蛋白的相互作用,介导肌肉的松弛。在肌肉收缩的钙离子调节机制中,TNNI1能抑制肌动蛋白-肌球蛋白复合物中钙离子介导的构象变化,从而防止肌肉在静息状态下发生非自主收缩。重组人TNNI1蛋白常被用于研究肌肉生理学、神经肌肉疾病机制以及开发相关诊断工具。
产品名称; Recombinant Human TNNI1
别名; 2700018B22Rik, AI747285, DKFZp451O223, si:dz182n13.3, slow skeletal muscle, slow-twitch isoform, SSTNI, TNN1, Tnni1, TNNI1_HUMAN, Troponin I, Troponin I slow skeletal muscle, Troponin I slow twitch isoform, troponin I type 1 (skeletal, slow), Troponin I, slow isoform
宿主; E.Coli
表达区间; 1-187
分子量; 20.5 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触结合蛋白14 | 组织脂蛋白相关磷脂酶A2(LP PLA2)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
亮氨酸拉链蛋白2 | 细胞总乳酸比色法定量酶联免疫试剂盒 |
GMS10电击感受态细菌转化试剂盒 | 载玻片细胞AKT蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织磷酸甲羟戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)活性 | 冰冻切片切片组织真菌高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 |
正常大鼠(Sprague Dawley)肺组织微粒体组分(5毫克/毫升) | γ-氨基丁酸A受体相关膜蛋白3 |
肝细胞粘附分子2 | HMX1蛋白抗体 |
石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜pcr检测试剂盒 | 组织肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶连续循环比色法定量pcr检测试剂盒 |
K-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒 | Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS) |
猪水肿病-志贺样毒素Ⅱ型变异体A | FITC标记小鼠CD22单克隆抗体 |
甲型流感病毒血凝素2 | 凝血酶原酶/纤维蛋白原2抗体 |
PE标记人CD185 (CXCR5)单克隆 | 动力相关蛋白1抗体 |
埃蒙氏(EMMONS)真菌培养基 | Recombinant Human TNNI1乙酰化组蛋白H2B K15抗体 |
AF750标记的神经元核抗原抗体 | APC标记小鼠CD107b单克隆抗体 |
关键字: TNNI1;20.5 kDa; 1-187;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。