重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人TRPT1(Recombinant Human TRPT1),全称tRNA 2'-磷酸转移酶1(tRNA 2'-phosphotransferase 1),是一种在科研中用于研究tRNA剪接机制、RNA代谢及细胞应激反应的重组蛋白。该蛋白通常在大肠杆菌(E. coli)表达系统中生产,为含有277个氨基酸的单条多肽链(包含1-253位天然序列及N端24个氨基酸的His标签),分子量约30.3 kDa。
产品名 | Recombinant Human TRPT1 | 分子量 | 27.7 kDa |
表达区间 | 1-253 | 货号 | XG-DB3688 |
别名
MGC11134, tRNA 2''-phosphotransferase 1, tRNA phosphotransferase 1, tRNA splicing 2' phosphotransferase 1, trpt1, TRPT1_HUMAN
宿主; E.Coli
表达区间; 1-253
分子量; 27.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸蛋白酶抑制剂B10 | DH5α电转感受态细菌 |
抗表皮生长因子 | 酵母β-内酰胺酶报告基因活性生物发光法定量酶联免疫试剂盒 |
咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | ER BETA 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
血液葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞半胱-13(CASPASE-13)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
动物源性食品牛源基因pcr检测试剂盒 | γ-连环素/连接蛋白γ抗体 |
富含亮氨酸重复蛋白3 | G蛋白β1抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基1 |
PARP蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 细胞磷酸二酯酶4(PDE4)活性酶连续循环光谱法定量pcr检测试剂盒 |
GST融合蛋白甘肽树脂再生试剂盒 | 石蜡切片脂质过氧化物4-羟基壬烯醛(4-HNE)荧光染色试剂盒 |
植烷酰辅酶A羟化酶2 | FITC标记小鼠CD154单克隆抗体 |
钾离子通道蛋白家族成员1样蛋白 | 膜蛋白CLDND2抗体 |
P5C还原酶1 | 蝶呤甲醇胺脱水酶1抗体 |
小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)鉴定 | Recombinant Human TRPT1胰羧肽酶B2抗体 |
磷酸化肿瘤抑制基因PTEN重组兔单克隆抗体 | 9号染色体开放阅读框156抗体 |
关键字: TRPT1;27.7 kDa ; 1-253;
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