重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
该蛋白是一种NADP(H)结合蛋白,核心功能是作为岩藻糖代谢的关键酶,催化GDP-4-酮-6-脱氧甘露糖的两步反应(差向异构化和还原反应),最终生成GDP-L-岩藻糖。这是岩藻糖基化修饰的唯一供体底物,对于多种糖蛋白(如血型抗原、生长因子受体)和糖脂的修饰至关重要。研究表明,TSTA3的异常表达与食管鳞癌、肺鳞癌等多种肿瘤的侵袭转移密切相关,通过调控LAMP2、ERBB2等蛋白的岩藻糖基化水平来影响肿瘤微环境和恶性进展。因此,重组人TSTA3是研究癌症糖生物学、开发抗肿瘤药物及诊断试剂的关键工具酶。
产品名称; Recombinant Human TSTA3
别名; 3 5 epimerase/4 reductase, 5-epimerase-4-reductase, anti TSTA3, EC 1.1.1.271, FCL_HUMAN, FX, GDP 4 keto 6 deoxy D mannose 3 5 epimerase 4 reductase, GDP 4 keto 6 deoxy D mannose epimerase reductase, GDP L fucose synthase, GDP-4-keto-6-deoxy-D-mannose-3, GDP-L-fucose synthase, P35B, Protein FX, Red cell NADP(H) binding protein, Red cell NADP(H)-binding protein, SDR4E1
宿主; E.Coli
表达区间; 1-321
分子量; 35.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
突触结合蛋白2 | 细胞5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FAM188B蛋白 | CDK4蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
啤酒糟β-葡聚糖含量酶连续反应比色法定量pcr检测试剂盒 | ERK蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
细菌5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性 | 化妆品阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞AURORA-A激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 钠氢通道蛋白抗体 |
高分子量激肽原轻链 | 低密度脂蛋白受体相关蛋白11抗体 |
活体组织线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒 | 冰冻切片胆色素格美林(Gmelin)染色试剂盒 |
GST融合蛋白THROMBIN酶切试剂盒 | 体液碱性磷酸酶活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
转录因子POU2F3 | 有丝分裂纺锤体蛋白1抗体 |
钾通道四聚体结构域蛋白11 | APC标记小鼠CD86单克隆抗体 |
PE标记小鼠CD86单克隆 | 磷酸化CREB-1抗体 |
AF750标记的FLIP | Recombinant Human TSTA3白细胞介素-10抗体 |
细胞胶原蛋白(collagen)比色法定量检测试剂盒 | KMT2H蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: TSTA3;35.2 kDa; 1-321;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。